Malaria: Current epidemiology, laboratory diagnosis, and challenges in the prevention of transfusion-transmitted malaria

 

Amadeo Sáez-Alquezar¹, Mauren Isfer Anghebem²

 

¹ Farmacêutico-Bioquímico. Assessor Científico do Programa Nacional de Controle de Qualidade (PNCQ). Consultor do Departamento de Controle de Doenças Tropicais Negligenciadas da OMS. Membro do Grupo Ibero-americano de Nomenclatura e Tradução (WG-IANT), Diagnóstico in vitro/IFCC. Membro do Grupo Técnico-Científico da Sociedade Brasileira de Análises Clínicas – SBAC.

² Farmacêutica-Bioquímica. Doutora em Ciências Farmacêuticas/Análises Clínicas, Professora Adjunta da Escola de Medicina e Ciências da Vida da Pontifícia Universidade Católica do Paraná. Professora Adjunta do Departamento de Análises Clínicas da Universidade Federal do Paraná/UFPR, Curitiba, PR, Brasil. Membro do Grupo Técnico-Científico da Sociedade Brasileira de Análises Clínicas – SBAC.

 

Recebido em 24/02/2026

Aprovado em 26/02/2026

DOI: 10.21877/2448-3877.202600290.pt

 

INTRODUÇÃO

 

A malária é uma doença infecciosa causada por protozoários do gênero Plasmodium, transmitidos sobretudo pela picada da fêmea do mosquito Anopheles. Apesar da disponibilidade de terapias eficazes e de sucessivas iniciativas de controle, a doença persiste como um dos maiores desafios de saúde pública em regiões tropicais e subtropicais, particularmente em contextos de vulnerabilidade social, precariedade de infraestrutura sanitária e limitações de acesso a serviços de saúde.^(1-3)

Os dados mais recentes da Organização Mundial da Saúde (OMS) indicam que, em 2024, foram notificados aproximadamente 282 milhões de casos de malária e mais de 610 mil óbitos em 80 países, com forte concentração na África subsaariana.^(1,4) Neste mesmo ano, cinco países – Nigéria (24,3%), República Democrática do Congo (12,5%), Uganda (4,7%), Etiópia (4,4%) e Moçambique (3,6%) – foram responsáveis ​​por quase metade de todos os casos.⁽⁴⁾ Nas Américas, a prevalência da doença é menor em termos relativos, mas permanece relevante em países como Brasil, Venezuela, Colômbia, Peru, Haiti e Bolívia.⁽⁵⁾ No Brasil, a maioria dos casos se concentra na Amazônia Legal, com predomínio de P. vivax, embora P. falciparum ainda seja responsável por parte dos casos graves e por óbitos. As mudanças ambientais, a mobilidade humana e a expansão de atividades como o garimpo têm contribuído para a manutenção da transmissão e risco de reintrodução em áreas não endêmicas.^(6,7)

Tradicionalmente, a transmissão da malária está associada ao ciclo vetorial, no qual o parasita alterna fases no mosquito e no hospedeiro humano. Entretanto, outras vias de transmissão vêm ganhando importância, especialmente em ambientes hospitalares e de hemoterapia. Entre elas, destaca-se a malária transfusional, que ocorre quando hemocomponentes contendo formas sanguíneas viáveis do parasito são transfundidos a receptores suscetíveis. Nesses casos, a ausência da fase hepática pré-eritrocítica pode encurtar o período de incubação e favorecer apresentações clínicas mais graves, sobretudo em indivíduos sem imunidade prévia.^(8,9)

Nesse contexto, o diagnóstico laboratorial assume papel central, tanto na abordagem clínica dos casos suspeitos quanto na prevenção da malária transfusional por meio da triagem adequada de doadores de sangue. A evolução das técnicas diagnósticas, da microscopia convencional para testes rápidos, métodos moleculares e ensaios de amplificação de ácidos nucleicos (NAT), ampliou as possibilidades de detecção de baixas parasitemias e infecções subclínicas, mas também trouxe novos desafios relacionados a custo, complexidade operacional e necessidade de infraestrutura especializada.^(10,11)

Esta revisão narrativa tem como objetivo integrar dados epidemiológicos atualizados, descrever criticamente as principais estratégias diagnósticas disponíveis e discutir os desafios atuais e perspectivas futuras para a prevenção da malária transfusional no Brasil, com foco na realidade dos serviços de hemoterapia e dos laboratórios de análises clínicas. A pesquisa foi realizada em base de dados PubMed, SciELO e diretrizes nacionais e internacionais sobre malária e transfusão sanguínea, sem limitação de datas, utilizando os descritores, em português, inglês e espanhol: malária, diagnóstico laboratorial da malária; malária transfusional; NAT para malária. Foram utilizados artigos contendo dados e informações que contemplassem os objetivos do trabalho.

 

EPIDEMIOLOGIA

 

Epidemiologia global

A malária continua entre as principais causas de doença e morte em países de baixa e média renda. Em 2024, estimativas globais apontaram 282 milhões de casos e cerca de 610 mil óbitos atribuídos à malária.⁽⁴⁾ A distribuição da doença permanece fortemente concentrada em países da África subsaariana, responsáveis por aproximadamente 94% dos casos e 95% das mortes, com destaque para o elevado impacto em crianças menores de cinco anos, que respondem por cerca de 80% dos óbitos.^(1,12)

Diversos fatores contribuem para a manutenção dessa elevada frequência, incluindo determinantes sociais (pobreza, moradias precárias, baixa escolaridade), ambientais (clima favorável ao vetor, desmatamento, uso de água não tratada), e estruturais (fragilidade dos sistemas de saúde, acesso limitado ao diagnóstico e ao tratamento). A emergência de resistência a inseticidas dos vetores e de resistência a antimaláricos em algumas regiões também representa ameaça adicional aos programas de controle.^(13,14)

 

Epidemiologia nas Américas

Na região das Américas, a incidência da malária apresentou tendência de redução ao longo das últimas décadas, embora com variações importantes entre os países. Entre 2000 e 2022, a taxa de incidência passou de aproximadamente 13,1 para 3,6 casos por 1.000 habitantes em risco, enquanto a mortalidade caiu de 0,7 para 0,2 óbitos por 100.000 habitantes. Esse declínio reflete a intensificação de ações de controle vetorial, incorporação de esquemas terapêuticos eficazes e ampliação do acesso ao diagnóstico.⁽⁵⁾

Apesar dessa tendência de queda global, ainda persistem áreas de transmissão intensa na bacia Amazônica e em regiões com dificuldades históricas de acesso a serviços de saúde. Em 2024, as Américas registraram mais de 537.000 casos de malária, um aumento de 6% em comparação com 2023 (505.000 casos). Bolívia, Peru, Colômbia, Haiti e Panamá apresentaram aumento na transmissão de malária em 2024 devido a fatores relacionados à migração interna, mineração de ouro, eventos climáticos como El Niño e acesso dificultado aos serviços de saúde em áreas remotas ou afetadas por conflitos. Os povos indígenas continuam sendo o grupo mais afetado, representando mais de um terço dos casos notificados e quase 30% das mortes.⁽¹⁵⁾

Quinze países da região das Américas ainda relatam áreas com transmissão de malária, sendo que Brasil (30%), Colômbia (24%) e Venezuela (19%) respondem por quase três quartos de todos os casos. Todavia, países como o Suriname mostram progresso rumo à eliminação.⁽¹⁵⁾

A maior parte da transmissão continua concentrada na bacia Amazônica e na costa do Pacífico da Colômbia (88%),⁽¹⁵⁾ onde Plasmodium vivax é a espécie predominante em termos de ocorrência, seguido por P. falciparum, enquanto P. malariae e P. ovale são menos frequentes, mas podem contribuir para infecções persistentes e quadros clínicos de longa duração, representando desafios para vigilância e eliminação, especialmente em áreas remotas com acesso limitado aos serviços de saúde.^(4,16)

 

Epidemiologia no Brasil

De acordo com os dados da OMS, em 2024 o número estimado de casos de malária no Brasil foi de 162.000.⁽⁴⁾ No Brasil, a malária é uma doença de notificação compulsória e a quase totalidade dos casos autóctones ocorre na Amazônia Legal (99%), abrangendo os estados do Acre, Amapá, Amazonas, parte do Maranhão, parte do Mato Grosso, Pará, Rondônia, Roraima e Tocantins. Nessa região, P. vivax responde pela maioria das notificações (aproximadamente 84%), enquanto P. falciparum (aproximadamente 16%) está mais associado a episódios de maior gravidade e ao risco de óbito.^(5,17)

Fatores como desmatamento, expansão de fronteiras agrícolas, mineração ilegal, construção de grandes empreendimentos e migração sazonal de trabalhadores têm contribuído para a manutenção de bolsões de transmissão. A mobilidade populacional entre áreas endêmicas e não endêmicas aumenta o risco de casos importados em regiões onde o vetor está presente, configurando cenário de possível reintrodução da transmissão.^(6,7)

Em paralelo, indivíduos previamente expostos que migram de áreas endêmicas para regiões não endêmicas podem manter parasitemias baixas e assintomáticas por longos períodos, o que inclui potenciais doadores de sangue. Esse aspecto epidemiológico é particularmente relevante para a discussão sobre malária transfusional e justifica a necessidade de estratégias de triagem mais sensíveis nos serviços de hemoterapia.⁽¹⁸⁾

 

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

 

Microscopia

A microscopia óptica do sangue periférico, utilizando esfregaço delgado e gota espessa corados, permanece como o método clássico de diagnóstico da malária e é amplamente considerada o padrão de referência em muitos cenários clínicos. A gota espessa aumenta a sensibilidade, enquanto o esfregaço delgado permite a melhor identificação da espécie e a avaliação morfológica das formas parasitárias.⁽¹⁹⁾

Quando realizada por microscopistas experientes, com leitura cuidadosa de grande número de campos, a microscopia pode detectar parasitemias na faixa de 5 a 50 parasitos/µL. No entanto, em situações de rotina, com menor tempo disponível para leitura e menor experiência do examinador, a sensibilidade cai significativamente, ultrapassando frequentemente o limiar de 200 parasitos/µL. Essa limitação torna a microscopia inadequada como método isolado para triagem de doadores assintomáticos, em especial em áreas endêmicas, nas quais são comuns infecções subclínicas de baixa parasitemia.^(20,21)

A microscopia tem papel relevante na detecção do parasito, na identificação das espécies, na diferenciação de estágios e na estimativa da densidade parasitária, fornecendo dados abrangentes para o tratamento. Todavia, para o contexto da pesquisa clínica, o estudo de Dhorda et al. (2020) enfatiza a necessidade de harmonização dos métodos microscópicos através de padrões mais rigorosos para garantir a consistência e a confiabilidade dos resultados. Tais padrões exigem alta especificidade (≤2,5% de falsos positivos) e procedimentos detalhados, como a padronização do volume de sangue na lâmina e a leitura de um mínimo de 200 campos de alta potência ou 2.500 leucócitos antes de liberar uma lâmina negativa.⁽²²⁾ A revisão de Coro et al. (2025) destacou que a microscopia apresenta desafios na implementação em cenários de recursos limitados, devido à necessidade de equipamentos, eletricidade e microscopistas especializados, o que a torna menos compatível com os critérios ASSURED, conjunto de especificações da OMS para avaliar a adequação de tecnologias de diagnóstico, especialmente para uso em países em desenvolvimento. No entanto, apesar dessas limitações, a microscopia tem potencial significativo de avanço para aplicações em ponto de atendimento por meio da incorporação de lentes de baixo custo e alta magnificação, processamento de imagem automatizado e inteligência artificial, visando melhorar a rapidez e reduzir a dependência de pessoal altamente treinado.⁽²³⁾

 

Testes rápidos

Os testes rápidos (TR) para malária, em geral baseados em imunocromatografia, permitem a detecção de antígenos específicos de Plasmodium em amostras de sangue periférico, como a proteína rica em histidina 2 (HRP2) e a lactato desidrogenase parasitária (pLDH). Esses ensaios têm a vantagem de serem simples, de fácil execução e não dependerem de infraestrutura laboratorial sofisticada, o que os torna particularmente úteis em cenários remotos ou com recursos limitados.^(11,24)

Uma revisão sistemática e metanálise que avaliou o desempenho dos TR de malária na África subsaariana demonstrou alta acurácia diagnóstica geral, com sensibilidade agrupada de 0,830 (95% IC: 0,752 a 0,887) e uma especificidade agrupada de 0,949 (95% IC: 0,913 a 0,971), evidenciada por uma razão de chances diagnósticas de 91.196. No entanto, o estudo revelou uma variabilidade significativa no desempenho entre os 48 estudos incluídos, com heterogeneidade notável (Bivariado I² de 0,733), o que ressalta a importância de estratégias diagnósticas específicas para cada região. Os principais desafios identificados incluem a persistência do antígeno HRP2 após o tratamento, causando resultados falsos positivos, e as deleções genéticas nos genes pfhrp2 e pfhrp3, que levam a resultados falsos negativos em testes baseados em HRP2. Adicionalmente, os testes rápidos atuais apresentam sensibilidade reduzida para detecção de parasitemia de baixa densidade e infecções assintomáticas, um fator limitante crucial para os objetivos de eliminação da malária. Ao comparar o desempenho pós-tratamento, os TR não-HRP2, como os que detectam pan pLDH, demonstraram ser mais confiáveis e estáveis em termos de sensibilidade e especificidade, em contraste com a especificidade variável dos TR baseados em HRP2.⁽²⁵⁾

Apesar da praticidade, resta claro que a sensibilidade dos TR depende da carga parasitária e pode variar conforme o fabricante e o alvo antigênico. Além disso, deleções nos genes pfhrp2 e pfhrp3, já descritas em vários países, podem comprometer o desempenho dos testes baseados exclusivamente em HRP2, resultando em falsos negativos, como já mencionado.^(25-29)

Um estudo observacional transversal analisou 365 amostras de P. falciparum, coletadas entre 2016 e 2018 no estado de Roraima, Brasil, provenientes majoritariamente de áreas de mineração na Venezuela e Guiana, a fim de caracterizar a prevalência de deleções dos genes pfhrp2 e pfhrp3 que comprometem os TR baseados na proteína HRP2. O principal achado foi a prevalência marcadamente baixa, de apenas 1%, de parasitos com deleção confirmada do gene pfhrp2 nos isolados circulantes no Planalto das Guianas Centro-Norte, o que contrasta com altas taxas relatadas na fronteira com o Peru. Embora a taxa de falsos negativos em TR baseados em HRP2 tenha sido de 6% no estudo, a maioria desses resultados divergentes (RDT−/PCR+) foi atribuída à baixa parasitemia. Consequentemente, como a prevalência de deleção de pfhrp2 está abaixo do limite de 5% estabelecido pela OMS para a substituição de TR, o estudo conclui que não há recomendação para alterar os testes de HRP2 na área investigada, destacando, contudo, a necessidade de vigilância contínua devido ao intenso movimento transfronteiriço.⁽³⁰⁾

Esses achados reforçam a importância da vigilância molecular contínua para o monitoramento da ocorrência dessas deleções em diferentes regiões, bem como a necessidade, sempre que possível, de associar o TR a outros métodos diagnósticos, especialmente em contextos críticos.⁽³¹⁾

 

Testes moleculares

Os testes moleculares representam o grupo de métodos com maior sensibilidade para detecção de Plasmodium, permitindo identificar parasitemias muito baixas, muitas vezes indetectáveis por microscopia ou TR. Entre as abordagens disponíveis, destacam-se a PCR (polymerase chain reaction ou reação em cadeia da polimerase) convencional, a nested-PCR ou “PCR aninhada”, a PCR em tempo real quantitativa (qPCR) e as técnicas de amplificação isotérmica, como a amplificação isotérmica mediada por loop ou LAMP, do inglês loop-mediated isothermal AMPlification.^(32,33)

Ensaios baseados na amplificação de regiões conservadas do gene 18S rRNA têm sido amplamente utilizados para detecção e diferenciação das espécies de Plasmodium, devido à presença de múltiplas cópias desse gene no genoma parasitário (5 a 8 cópias por genoma). Em estudos comparativos, a qPCR tem demonstrado desempenho superior à microscopia e aos TR na detecção de infecções assintomáticas, revelando um grande contingente de portadores submicroscópicos em áreas endêmicas.⁽³²⁾

As técnicas de LAMP apresentam, em geral, sensibilidade um pouco inferior à da qPCR, mas têm a vantagem de dispensar termocicladores e poderem ser executadas com infraestrutura mais simples, o que as torna interessantes para uso em campo. Em contrapartida, a padronização entre diferentes plataformas ainda é um desafio, e o custo pode ser uma barreira em larga escala.^(33,34)

A avaliação de campo conduzida por Viana et al. (2018) em Cruzeiro do Sul, Acre, Brasil, objetivou determinar o desempenho do ensaio molecular RealAmp (LAMP em tempo real), uma ferramenta baseada em LAMP, para o diagnóstico da malária em uma área remota com infraestrutura laboratorial limitada. O estudo transversal incluiu 1.000 pacientes com febre ou histórico de febre, utilizando uma combinação de PCR em tempo real e nested-PCR como teste de referência. O RealAmp foi executado por profissionais sem experiência prévia em técnicas moleculares, utilizando um protocolo simplificado de extração de DNA por tratamento térmico (boil and spin). Em comparação com o teste de referência, o RealAmp demonstrou alta sensibilidade, 94,1% (IC 95%: 90,1 a 96,8), e especificidade de 83,9% (IC 95%: 81,1 a 86,4) no laboratório de campo. Os achados demonstraram que o desempenho do RealAmp foi comparável ao da microscopia realizada por profissionais experientes (sensibilidade de 96,4%), corroborando a viabilidade da implementação de testes moleculares simplificados em cenários com recursos limitados. No entanto, o estudo evidenciou limitações na detecção de infecções mistas por P. falciparum e P. vivax, uma vez que nem o RealAmp nem a microscopia identificaram 20 casos confirmados pelo teste de referência.⁽³⁵⁾

Os métodos moleculares ultrassensíveis permitem a detecção de DNA ou RNA com limites de detecção de até 0,1 parasito/µL ou inferiores. Embora técnicas como o qPCR ultrassensível requeiram laboratórios altamente equipados, abordagens alternativas, como LAMP, oferecem soluções mais portáteis, mantendo elevada sensibilidade analítica. A implementação desses testes ultrassensíveis é mais relevante em três contextos específicos: a detecção de infecções assintomáticas associadas a baixa parasitemia, o diagnóstico da malária na gestação e o uso estratégico em campanhas de eliminação da doença. As infecções de baixa densidade, que são perdidas pelos métodos tradicionais, são responsáveis por 30% a 50% da transmissão contínua e contribuem para prognósticos clínicos de longo prazo desfavoráveis, como anemia crônica e prejuízo cognitivo em crianças. Embora esses métodos moleculares possam não ser viáveis na atenção primária em países de baixa e média renda, há consenso de que as políticas de implementação devem ser adaptadas ao contexto epidemiológico local, visando sobretudo gestantes, portadores assintomáticos e populações residentes em áreas que se aproximam da eliminação da malária^.(36)

Ferramentas moleculares, incluindo testes de amplificação de ácido nucleico (NAT – nucleic acid test), permitem detecção sensível e específica desses casos, além de caracterizarem a diversidade genética do Plasmodium, marcadores de resistência a medicamentos e padrões de transmissão, informações essenciais para vigilância, intervenções dirigidas e avaliação de impacto de programas de controle. A incorporação sistemática desses métodos pode transformar a vigilância epidemiológica, orientar intervenções focalizadas e acelerar a eliminação em cenários de baixa transmissão, embora seja necessário superar barreiras de implementação em ambientes endêmicos.⁽³⁷⁾

Na área de hemoterapia, a implementação de NAT para malária, de forma semelhante ao que já ocorre para a pesquisa de HIV (Vírus da Imunodeficiência Humana), HCV (Vírus da Hepatite C) e HBV (Vírus da Hepatite B), representa um passo importante na redução do risco transfusional. Esses testes, quando utilizados em pool de 6 amostras e posteriormente em amostras individuais de doadores reagentes, permitem identificar infecções subclínicas com parasitemias muito baixas, aumentando significativamente a segurança transfusional.⁽³⁸⁾

Uma avaliação observacional retrospectiva, conduzida na Fundação Hospitalar de Hematologia e Hemoterapia do Amazonas (HEMOAM), em Manaus, Brasil (principal área endêmica do país), teve como objetivo descrever a positividade e o perfil epidemiológico de doadores de sangue únicos (N = 67.114) submetidos à triagem molecular para Plasmodium spp. por meio do ensaio NAT PLUS HIV/HBV/HCV/Malária, no período de janeiro de 2023 a junho de 2024. O desfecho principal foi a baixa frequência de positividade para malária (0,01%; 8/67.114), sendo particularmente relevante o achado de que todos os doadores reativos se encontravam assintomáticos no momento da triagem clínica.

O perfil epidemiológico predominante entre os doadores positivos incluiu indivíduos do sexo masculino (75%), pardos (87,5%) e residentes em Manaus, refletindo um perfil consistente com a população doadora local. O estudo reforça a importância do rastreio molecular ao demonstrar que um dos doadores positivos evoluiu para malária sintomática por P. falciparum, posteriormente confirmada por esfregaço sanguíneo e notificada logo após a doação. Isso evidencia a capacidade do NAT PLUS HIV/HBV/HCV/Malária de identificar infecções assintomáticas de baixa densidade que representam risco potencial à segurança transfusional.⁽³⁹⁾

 

Testes sorológicos

Os testes sorológicos para malária, como a imunofluorescência indireta e os ensaios ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay ou ensaios imunoenzimáticos), detectam anticorpos contra antígenos de Plasmodium, refletindo exposição prévia à infecção. Embora possam ser úteis em estudos epidemiológicos e de vigilância, a sorologia convencional não permite distinguir infecções ativas de infecções passadas, uma vez que os anticorpos podem persistir por meses ou anos após a resolução clínica.^(40,41) Em função dessa limitação, os testes sorológicos não são recomendados como método principal de diagnóstico em casos agudos nem como ferramenta isolada na triagem de doadores em áreas endêmicas, onde a exposição prévia é frequente. Seu uso tende a ser mais apropriado em áreas não endêmicas, em combinação com entrevista epidemiológica detalhada, ou em contextos de investigação de exposição em viajantes e populações específicas.⁽⁴²⁾

Um estudo realizado no Brasil teve como objetivo estabelecer critérios de triagem adequados para doadores de sangue em regiões brasileiras com distintos perfis epidemiológicos para malária, contemplando áreas sem transmissão vetorial (São Paulo-SP), área de baixa transmissão ativa (Belém-PA) e áreas de alta transmissão ativa (Matupá e Peixoto de Azevedo-MT). A estratégia adotada combinou triagem clínico-epidemiológica com métodos laboratoriais diretos para pesquisa de plasmódios ou antígenos parasitários — gota espessa, QBC Test® e imunofluorescência — além de sorologia por imunofluorescência indireta (IFI-IgG anti-Plasmodium vivax e Plasmodium falciparum) para detecção de anticorpos antiplasmodiais. Todos os métodos diretos de pesquisa de plasmódios ou antígenos resultaram negativos em todas as amostras analisadas. Em contraste, a sorologia demonstrou grande variação na positividade entre as diferentes regiões, atingindo 1,98% em doadores aptos em São Paulo, 17,2% em Belém e 80,6% em Matupá/Peixoto de Azevedo. A diferença significativa na soropositividade entre doadores aptos e inaptos em São Paulo e Belém (p < 0,01) evidenciou a efetividade da triagem clínico-epidemiológica para exclusão de indivíduos sob risco em áreas de baixa ou inexistente transmissão. Com base nesses achados, os autores concluem que a triagem de doadores deve ser pautada por critérios clínico-epidemiológicos ajustados à realidade epidemiológica de cada região e que, do ponto de vista laboratorial, os métodos mais adequados são aqueles voltados à detecção direta de plasmódios ou de antígenos parasitários. Em áreas de alta endemicidade, a sorologia é pouco informativa devido à alta positividade, tornando fundamental a inclusão de testes diretos como a gota espessa e/ou o QBC Test®, como ferramentas essenciais na triagem para malária em bancos de sangue.⁽⁴³⁾

Uma revisão sistemática analisou a soroprevalência da malária na Amazônia Brasileira. A síntese qualitativa de 23 estudos identificou anticorpos IgG dirigidos à proteína circunsporozoíta (CSP) de P. falciparum e P. vivax, bem como à região C-terminal de 19 kDa da proteína 1 de superfície do merozoíta de P. vivax (PvMSP1-19), como potenciais biomarcadores de exposição à malária em áreas com transmissão variável e instável. No entanto, a revisão evidenciou considerável heterogeneidade quanto aos antígenos avaliados e ausência de padronização dos ensaios sorológicos, concluindo que a harmonização dos antígenos alvo e dos métodos analíticos é um passo essencial para a incorporação efetiva da soroprevalência como ferramenta de vigilância no Programa Brasileiro de Controle da Malária.⁽⁴⁴⁾

Helb et al. (2015) avaliaram as respostas de anticorpos a 856 antígenos de P. falciparum utilizando microarranjo de proteínas, em 186 crianças ugandenses com histórico de exposição bem caracterizado. Utilizando métodos estatísticos adaptativos, o achado principal foi a identificação de um conjunto limitado de biomarcadores, no qual as respostas a apenas três antígenos inéditos de P. falciparum foram capazes de classificar com precisão se um indivíduo havia sido infectado nos últimos 30, 90 ou 365 dias, com área sob a curva (AUC) variando de 0,86 a 0,93. Além disso, a medida das respostas a seis antígenos permitiu estimar com acurácia a incidência individual de malária no ano anterior. Esse novo método demonstra o potencial de gerar estimativas quantitativas precisas da exposição ao P. falciparum em nível individual e comunitário a partir de amostras transversais, superando as limitações e a menor resolução dos ensaios sorológicos tradicionais baseados em um número reduzido de antígenos convencionais.⁽⁴¹⁾

Outro estudo avaliou a viabilidade do uso de um ensaio sorológico multiplex para sorovigilância da exposição à malária em militares americanos destacados em regiões endêmicas. A metodologia envolveu a medição simultânea de respostas de anticorpos contra antígenos do vetor Anopheles (como gSG6P1 e gSG6P2, indicativos de picada de mosquito) e a antígenos do parasito P. falciparum, incluindo proteínas do estágio esporozoíta (como a CSP) e estágios sanguíneos (como MSP-1). Os resultados demonstraram a factibilidade da utilização da plataforma multiplex de eletroquimioluminescência em amostras coletadas após o destacamento para países africanos. Em militares que faziam uso rotineiro de quimioprofilaxia, observou-se que alguns indivíduos apresentaram níveis de anticorpos anti-CSP comparáveis aos de populações residentes em áreas endêmicas, sugerindo exposição a esporozoítas por picadas de mosquitos infectados, apesar da profilaxia eficaz. Além disso, casos isolados de altos níveis de anticorpos anti-MSP-1 sugeriram possíveis infecções sintomáticas ou subclínicas. Em conjunto, os achados demonstram que a sorovigilância multiplex pode atuar como ferramenta complementar à vigilância passiva, ao permitir a avaliação do risco e da exposição à malária, além de fornecer subsídios para analisar a eficácia da quimioprofilaxia na prevenção da infecção do estágio sanguíneo.⁽⁴⁵⁾

A Tabela 1 traz um resumo comparativo dos métodos diagnósticos para malária.

 

Tabela 1

Comparativo entre os Métodos Diagnósticos para Malária

Método	Sensibilidade Estimada	Vantagens	Limitações
Microscopia	5 a 50 parasitos/µL; rotina >200/µL	Padrão clássico; baixo custo; acessível	Baixa sensibilidade em doadores assintomáticos; operador-dependente
Testes rápidos	100 a 200 parasitos/µL 70% a 100% de sensibilidade	Rápidos; não requerem  infraestrutura	Falsos negativos por deleções pfhrp2/3; variabilidade
PCR Convencional/Nested	0,1 a 1 parasito/µL	Alta sensibilidade	Alto custo; infraestrutura
qPCR	<0,1 parasito/µL	Mais sensível; permite quantificação	Alto custo
LAMP	2 a 8 parasitos/µL	Sem termociclador; Uso em campo; Sensibilidade superior à microscopia	Padronização; Custo; Sensibilidade inferior à qPCR
Sorologia	Detecção de anticorpos	Vigilância/epidemiologia	Não distingue infecção ativa
NAT	<0,1 parasito/µL	Alta segurança transfusional	Custo; infraestrutura

Legenda: PCR – reação em cadeia da polimerase; qPCR – reação em cadeia da polimerase em tempo real; LAMP – amplificação isotérmica mediada por loop; NAT – teste de amplificação de ácido nucleico.

Fonte: Adaptado de ^{(22,23,32-35,40,42)}.

 

MALÁRIA TRANSFUSIONAL

 

A malária transmitida por transfusão, ou malária transfusional, ocorre quando hemocomponentes contendo formas sanguíneas viáveis de Plasmodium são transfundidos para receptores suscetíveis. Os hemocomponentes mais frequentemente implicados em casos de malária transfusional são sangue total, concentrado de hemácias e concentrado de plaquetas, em função da presença de eritrócitos residuais. Plasma fresco congelado, por conter poucos eritrócitos, raramente está associado à transmissão.^(38,46,47)

Ao contrário da transmissão vetorial, a infecção transfusional não envolve a fase hepática pré-eritrocítica durante a qual se ativa a imunidade inata para proteger o hospedeiro. Os parasitas são introduzidos diretamente na circulação, o que pode encurtar o período de incubação e favorecer apresentações clínicas abruptas e graves, especialmente em indivíduos sem imunidade prévia.^(8,46) Tais condições reforçam a necessidade de métodos diagnósticos mais sensíveis do que a microscopia e os TR tradicionais.⁽⁴⁸⁾

A malária transfusional permanece um desafio crítico para os sistemas hemoterápicos em todo o mundo, sobretudo em países com circulação ativa de Plasmodium ou intensa mobilidade populacional entre áreas endêmicas e não endêmicas.

Fatores como imunidade parcial, persistência prolongada do parasita, baixa carga parasitária e elevada proporção de doadores assintomáticos contribuem diretamente para o risco transfusional.^(49,50) Historicamente, diversos países adotaram abordagens distintas para mitigar o risco de malária transmitida por transfusão, combinando entrevistas padronizadas, critérios de inaptidão temporária baseados em viagem ou residência em áreas endêmicas, microscopia e, em alguns casos, testes sorológicos. No entanto, tais estratégias apresentam limitações evidentes em contextos de elevada endemicidade ou de grande mobilidade populacional.^(8,51)

A Tabela 2 apresenta uma síntese comparativa das principais estratégias adotadas para a triagem de malária transfusional em diferentes regiões do mundo, incluindo métodos laboratoriais, abordagens regulatórias, limitações e evidências recentes, com destaque para o Brasil.

 

Tabela 2

Estratégias de triagem para prevenção da malária transfusional em diferentes regiões do mundo

Região / País	Estratégia de triagem	Métodos laboratoriais	Base regulatória	Principais limitações	Observações / Evidências
África Subsaariana	Triagem clínica e epidemiológica associada a microscopia/TR ou ausente	Microscopia, TR; PCR em estudos	Diretrizes nacionais + WHO	Alta endemicidade; portadores assintomáticos; deleções pfhrp2/3	Risco residual significativo mesmo após triagem convencional a,b
Europa Ocidental	Exclusão temporária por viagem ou residência em áreas endêmicas	Entrevista epidemiológica; sorologia; PCR/NAT em centros especializados	Políticas nacionais e ECDC	Redução do pool de doadores; casos importados	Detecção de doadores assintomáticos apenas por PCR no Reino Unido c
Estados Unidos	Inaptidão temporária baseada em histórico epidemiológico	Entrevista epidemiológica; PCR/NAT em protocolos específicos	CDC / FDA	Dependência excessiva da entrevista; risco residual	Casos documentados de malária transfusional em doadores assintomáticos d
Ásia / Sudeste Asiático	Triagem combinada com expansão de métodos moleculares	Microscopia, TR, PCR	Políticas nacionais variáveis	Alta mobilidade populacional; heterogeneidade epidemiológica	Uso crescente de PCR em cenários de eliminação e
Brasil	Triagem integrada com NAT já obrigatório	Entrevista epidemiológica + kit NAT PLUS HIV/HBV/HCV/Malária	Nota Técnica MS nº 49/2023	Custo, infraestrutura e capacitação	Marco regulatório nacional alinhado às melhores práticas internacionais f,g

Legenda: TR – Teste rápido; PCR – reação em cadeia da polimerase; NAT – teste de amplificação de ácido nucleico; WHO – World Health Organization (Organização Mundial da Saúde); ECDC – European Centre for Disease Prevention and Control  (Centro Europeu para a Prevenção e Controle de Doenças); CDC – Centers for Disease Control and Prevention (Centros de Controle e Prevenção de Doenças); FDA – Food and Drug Administration (Administração de Alimentos e Medicamentos); NAT PLUS HIV/HBV/HCV/Malária – Kit diagnóstico Bio-Manguinhos (Fiocruz). Observações: ^a Estudos africanos demonstram risco residual de malária transfusional mesmo com microscopia e TR. ^b A Organização Mundial de Saúde recomenda vigilância molecular progressiva em regiões de alta endemicidade. ^c Estudos no Reino Unido identificaram DNA de Plasmodium em doadores assintomáticos com testes convencionais negativos. ^d Casos históricos nos EUA evidenciam limitações da triagem baseada apenas em entrevista. ^e Países asiáticos em fase de eliminação ampliaram o uso de PCR para vigilância. ^f Implementação do kit NAT PLUS no Brasil representa avanço regulatório. ^g Estudos nacionais demonstram positividade molecular em doadores de áreas endêmicas e não endêmicas.

Fonte: Adaptado de ^{(38,39,48,52-55)}.

 

Doadores oriundos de áreas endêmicas, com exposição prévia repetida, podem desenvolver imunidade parcial e manter parasitemias muito baixas, frequentemente assintomáticas e submicroscópicas. Ainda assim, essas parasitemias são suficientes para causar infecção em receptores não imunes. Estudos clássicos demonstraram que a infusão de aproximadamente 10 parasitos de P. vivax pode ser suficiente para estabelecer infecção. Em termos práticos, isso implica que um doador com parasitemia de 1 a 2 parasitos/µL pode contribuir com centenas de milhares de parasitos em uma única unidade de sangue.^(49,56)

Outro aspecto relevante é a capacidade de persistência do parasito. P. malariae é conhecido por manter infecções de longa duração, podendo permanecer no hospedeiro por décadas. P. vivax e P. ovale podem persistir por mais de três anos, enquanto P. falciparum também pode ser detectado por períodos prolongados em alguns indivíduos.  Esse longo tempo de permanência significa que doadores que deixaram áreas endêmicas muitos anos antes ainda podem representar risco transfusional.^(56-59)

A Tabela 3 destaca os principais fatores de risco para malária transmitida por transfusão.

Os receptores mais vulneráveis incluem crianças, gestantes, idosos, indivíduos imunossuprimidos e pacientes com comorbidades graves, nos quais um episódio de malária pode desencadear descompensações clínicas importantes. As evidências mostram que episódios graves de malária transfusional ocorrem majoritariamente em receptores sem imunidade prévia, com letalidade variando entre 3% e 12%.^(50,51)

Uma revisão sistemática de malária transfusional nas Américas identificou um total de 422 casos de malária transfusional relatados entre 1971 e 2016, dos quais aproximadamente 40,3% ocorreram nos Estados Unidos da América. A espécie P. malariae foi responsável pela maioria dos casos e a letalidade observada foi de 5,3%.⁽⁶⁰⁾

Diante desse cenário, a malária transfusional deve ser encarada como um evento potencialmente grave, porém evitável, desde que sejam adotadas estratégias adequadas de seleção de doadores e métodos diagnósticos sensíveis nos serviços de hemoterapia.⁽³⁸⁾

 

Tabela 3

Principais fatores de risco para a malária transfusional

Fator	Característica	Probabilidade estimada	Gravidade associada	Métodos que detectam	Referências
Doadores assintomáticos	Portadores submicroscópicos que podem permanecer meses a anos com parasitemia baixa.	Alta	Moderada a alta, dependendo da espécie e do receptor.	PCR, qPCR, NAT	(46,49)
Persistência prolongada	Infecções de longa duração devido à biologia das espécies (ex.: hipnozoítos, baixa clonalidade).	Moderada	Moderada; risco prolongado para hemoterapia.	PCR, NAT	(46,59)
Alta infectividade	Inóculos mínimos suficientes para causar infecção mesmo em parasitemia <1 parasito/µL.	Muito alta	Alta em receptores não imunes.	qPCR, NAT	(8,51)
Espécie envolvida	Espécies com persistência maior ou tropismo específico aumentam risco transfusional.	Variável	Alta para P. falciparum; prolongada para P. malariae.	Microscopia, PCR, NAT	(46)
Receptores vulneráveis	Indivíduos sem imunidade, gestantes, idosos, imunossuprimidos e pacientes graves.	Alta	Muito alta; maior letalidade documentada.	Todos	(38,46)

Legenda: PCR – reação em cadeia da polimerase; qPCR – reação em cadeia da polimerase em tempo real; NAT – teste de amplificação de ácido nucleico.

 

TRIAGEM DE DOADORES E IMPLEMENTAÇÃO DO NAT NO BRASIL

 

A malária transfusional representa um risco significativo para os serviços de hemoterapia em todo o mundo, devido à possibilidade de infecções assintomáticas em doadores. A triagem de doadores de sangue com o objetivo de prevenir a malária transfusional envolve a combinação de avaliação clínica, epidemiológica e laboratorial. Em áreas endêmicas, onde a exposição à malária é frequente, a simples exclusão de doadores com história de febre recente ou viagem pode não ser suficiente, uma vez que muitos indivíduos apresentam infecções assintomáticas com baixa carga parasitária.⁽⁵¹⁾

Tradicionalmente, a triagem em bancos de sangue, inclusive no Brasil, tem se baseado na microscopia, apesar de suas limitações na detecção de parasitemia de baixa densidade, ou no rastreio geográfico dos doadores. Contudo, a necessidade de uma ferramenta de triagem com alta sensibilidade para a prevenção da malária transfusional em áreas endêmicas do Brasil, como a Amazônia, impulsionou a validação de métodos moleculares. Em 2020, o estudo de Rocha et al. avaliou a inclusão de um ensaio NAT direcionado ao gene 18S rRNA do Plasmodium spp, à plataforma NAT brasileira já utilizada obrigatoriamente para triagem do HIV, HCV e HBV. A implementação desse protótipo NAT HIV/HCV/HBV/malária demonstrou ser eficaz na detecção de candidatos à doação infectados, revelando uma prevalência de 0,06% em um estudo piloto em Manaus (HEMOAM). Esses achados demonstraram o potencial do ensaio para reduzir o risco de malária transfusional por meio do descarte de unidades positivas, contribuindo de forma significativa para o aprimoramento da segurança transfusional.⁽⁴⁸⁾

A Tabela 4 sintetiza os principais pontos fortes e limitações do uso do NAT para malária na triagem de doadores de sangue, considerando aspectos técnicos, operacionais e epidemiológicos, com base em evidências científicas recentes e diretrizes internacionais.

 

Tabela 4

Pontos fortes e limitações do NAT para malária na triagem transfusional

Dimensão avaliada	Pontos fortes do NAT	Limitações do NAT	Implicações para a hemoterapia
Sensibilidade diagnóstica	Alta sensibilidade para detectar parasitemias muito baixas e infecções submicroscópicas, inclusive em doadores assintomáticos.	Possibilidade de resultados falsos negativos em parasitemias extremamente baixas abaixo do limite analítico.	Redução expressiva do risco transfusional em comparação com microscopia e TR a,b
Especificidade	Alta especificidade quando primers/probes são bem desenhados e validados.	Risco teórico de contaminação cruzada se boas práticas laboratoriais não forem rigorosamente seguidas.	Necessidade de controle de qualidade e validação contínua c
Abrangência de espécies	Capacidade de detectar múltiplas espécies de Plasmodium em ensaios multiplex.	Dependência do desenho molecular do ensaio para cobertura de espécies raras.	Importante em áreas com circulação de múltiplas espécies d
Aplicabilidade em doadores assintomáticos	Identifica portadores assintomáticos e subclínicos não detectados por métodos convencionais.	Não diferencia infecção ativa viável de DNA residual em casos raros.	Melhora a segurança em áreas endêmicas e não endêmicas e
Aspectos operacionais	Possibilidade de testagem em pool, otimizando custo e tempo.	Necessidade de infraestrutura tecnológica e pessoal treinado.	Requer investimento inicial, mas custo-efetivo a médio prazo f
Integração com outros métodos	Complementa entrevista epidemiológica, microscopia e TR.	Não substitui completamente a avaliação clínica e epidemiológica.	Abordagem em camadas aumenta robustez do sistema g

Legenda: NAT – teste de amplificação de ácido nucleico; TR – teste diagnóstico rápido

Observações: ^a NAT detecta parasitemias submicroscópicas associadas a risco transfusional. ^b Estudos demonstram sensibilidade superior a 95% em ensaios comerciais validados. ^c Programas de garantia da qualidade são essenciais para evitar contaminação. ^d Ensaios multiplex ampliam a cobertura de espécies de Plasmodium. ^e Portadores assintomáticos representam importante fonte de risco transfusional. ^f Avaliações econômicas indicam custo-efetividade do NAT em áreas endêmicas. ^g Estratégias integradas são recomendadas por diretrizes internacionais.

Fonte: Adaptado de ^{(8,32,38,39,46,48-50,53,61)}

O estudo de Costa et al. (2024) avaliou o desempenho e a aplicabilidade do kit brasileiro NAT PLUS HIV/HBV/HCV/Malária (Bio-Manguinhos) na detecção de Plasmodium spp. em doadores de sangue assintomáticos, reforçando seu papel estratégico para a segurança transfusional no Brasil. Em um cenário endêmico, os autores demonstraram que a inclusão da triagem molecular para malária em uma plataforma NAT já consolidada permitiu a identificação de infecções subclínicas de baixa parasitemia que não seriam detectadas pela triagem clínica convencional. Os resultados evidenciaram alta sensibilidade analítica do ensaio para P. falciparum e P. vivax, confirmando sua capacidade de interromper potenciais eventos de malária transmitida por transfusão por meio do descarte de hemocomponentes reativos. O trabalho destaca, ainda, a viabilidade operacional da implementação do NAT malária na rotina dos hemocentros brasileiros, uma vez que o teste é integrado a um sistema já utilizado nacionalmente, oferecendo uma solução tecnicamente robusta, escalável e alinhada às necessidades de vigilância em áreas endêmicas e de transição para a eliminação da malária.⁽⁵³⁾

A Nota Técnica nº 49/2023, publicada no Brasil pelo Ministério da Saúde, representou um marco na abordagem da malária transfusional, ao estabelecer a utilização do NAT PLUS HIV/HBV/HCV/Malária na triagem de doadores.⁽⁵⁴⁾ Na prática, a triagem é realizada em pool de amostras de plasma e, diante de resultado reagente, procede-se ao teste individual dos doadores incluídos naquele pool. Doadores com resultado positivo devem ter todos os hemocomponentes bloqueados, ser convocados para orientação, encaminhamento para serviço especializado, confirmação diagnóstica e tratamento adequado. Além disso, recomenda-se a retrovigilância dos receptores que receberam hemácias, plaquetas ou granulócitos provenientes de doações anteriores daquele doador, dentro de janela temporal definida, para investigação de possível transmissão.^(39,48,54)

A adoção do NAT para malária coloca o sistema hemoterápico brasileiro em consonância com práticas de segurança transfusional de países que já utilizam testes moleculares para outros agentes, como HIV, HBV e HCV. Embora existam desafios relacionados a custo, infraestrutura tecnológica e necessidade de treinamento de equipes, os benefícios em termos de redução do risco transfusional são expressivos, especialmente em um país com áreas endêmicas ativas.⁽⁵⁴⁾

A prevenção da malária transfusional requer uma abordagem integrada, unindo entrevista epidemiológica, diagnósticos sensíveis e vigilância molecular contínua. A médio e longo prazo, é plausível que a combinação de NAT com estratégias aprimoradas de entrevista epidemiológica e, quando apropriado, com outros métodos diagnósticos resulte em um sistema de triagem mais robusto, reduzindo ainda mais a probabilidade de ocorrência de malária transfusional.^(50,51,62)

 

CONSIDERAÇÕES FINAIS

 

A malária permanece como um relevante problema de saúde pública em níveis global e regional, mesmo diante dos avanços terapêuticos e das estratégias de controle implementadas. Além da transmissão vetorial, a possibilidade de transmissão por transfusão sanguínea impõe desafios adicionais, especialmente em contextos marcados por endemicidade e elevada mobilidade populacional.^(1,4)

O diagnóstico laboratorial desempenha papel central tanto no manejo clínico quanto na prevenção da malária transfusional. A microscopia permanece fundamental na prática clínica, mas não é suficiente para triagem de doadores em áreas endêmicas devido à sua incapacidade de detectar parasitemias muito baixas de forma consistente. Os testes rápidos oferecem agilidade e facilidade de uso, porém têm seu desempenho afetado por variabilidade intrínseca e por deleções em genes alvo, como pfhrp2 e pfhrp3. Nesse cenário, os métodos moleculares, em especial a qPCR e o NAT, surgem como ferramentas estratégicas para a identificação de infecções submicroscópicas, oferecendo nível de segurança superior.^{(11,24,25,63)}

A implementação do NAT para malária na rotina de triagem de doadores no Brasil representa um importante avanço na segurança transfusional, alinhando o país às melhores práticas internacionais e respondendo às peculiaridades epidemiológicas da região Amazônica. Ainda assim, a efetividade dessa estratégia depende da manutenção de sistemas de vigilância atuantes, da adequada capacitação das equipes de laboratório e hemoterapia e do investimento contínuo em infraestrutura tecnológica.⁽⁵⁴⁾

É aconselhável que cada país estabeleça uma logística a nível nacional para poder implementar adequadamente a triagem por testes moleculares para malária, de preferência, junto aos testes NAT utilizados nos bancos de sangue. Ao mesmo tempo é de fundamental importância a adoção, nos laboratórios responsáveis pela triagem, de critérios para os procedimentos de controle de qualidade interno e externo para os testes moleculares de malária.

A prevenção da malária transfusional, portanto, não se resume à escolha de um único teste, mas requer uma abordagem integrada, que envolva políticas públicas coerentes, vigilância epidemiológica robusta, diagnóstico laboratorial sensível e acessível, e educação continuada de profissionais de saúde.^(8,32,50) À medida que novas tecnologias surgirem, será possível refinar ainda mais as estratégias de prevenção, assegurando maior proteção aos receptores de sangue e contribuindo de forma efetiva para a redução do impacto da malária na população.

 

REFERÊNCIAS

 

1. World Health Organization. World Malaria Report 2023. Geneva; 2023.
2. Venkatesan P. The 2023 WHO World malaria report. Lancet Microbe. 2024 Mar;5(3):e214.
3. Feachem RGA, Chen I, Akbari O, Bertozzi-Villa A, Bhatt S, Binka F, et al. Malaria eradication within a generation: ambitious, achievable, and necessary. Lancet. 2019 Sep 21;394(10203):1056–112.
4. World Health Organization. World malaria report 2025: addressing the threat of antimalarial drug resistance. Geneva; 2025.
5. Recht J, Siqueira AM, Monteiro WM, Herrera SM, Herrera S, Lacerda MVG. Malaria in Brazil, Colombia, Peru and Venezuela: current challenges in malaria control and elimination. Malar J. 2017 Jul 4;16(1):273.
6. Arisco NJ, Peterka C, Diniz C, Singer BH, Castro MC. Ecological change increases malaria risk in the Brazilian Amazon. Proc Natl Acad Sci U S A. 2024 Oct 29;121(44):e2409583121.
7. Castro MC, Arisco NJ, Diniz CG, Ponmattam J, Peterka C, Basta PC, et al. Mining and malaria in the Brazilian Amazon and in the Yanomami indigenous land. PLoS Negl Trop Dis. 2025 Nov;19(11):e0013677.
8. Kitchen AD, Chiodini PL. Malaria and blood transfusion. Vox Sang. 2006 Feb;90(2):77–84.
9. Busch MP, Bloch EM, Kleinman S. Prevention of transfusion-transmitted infections. Blood. 2019 Apr 25;133(17):1854–64.
10. Moody A. Rapid diagnostic tests for malaria parasites. Clin Microbiol Rev. 2002 Jan;15(1):66–78.
11. Berzosa P, de Lucio A, Romay-Barja M, Herrador Z, González V, García L, et al. Comparison of three diagnostic methods (microscopy, RDT, and PCR) for the detection of malaria parasites in representative samples from Equatorial Guinea. Malar J. 2018 Sep 17;17(1):333.
12. Bhatt S, Weiss DJ, Cameron E, Bisanzio D, Mappin B, Dalrymple U, et al. The effect of malaria control on Plasmodium falciparum in Africa between 2000 and 2015. Nature. 2015 Oct 8;526(7572):207–11.
13. Riveron JM, Tchouakui M, Mugenzi L, Menze BD, Chiang MC, Wondji CS. Insecticide Resistance in Malaria Vectors: An Update at a Global Scale. In: Towards Malaria Elimination – A Leap Forward. InTech; 2018.
14. Conrad MD, Rosenthal PJ. Antimalarial drug resistance in Africa: the calm before the storm? Lancet Infect Dis. 2019 Oct;19(10):e338–51.
15. Pan American Health Organization. https://www.paho.org/en/news/6-11-2025-malaria-day-americas-paho-urges-countries-close-access-gaps-diagnosis-and-treatment#:~:text=Fifteen%20countries%20and%20one%20territory,remote%20or%20conflict%2Daffected%20areas. 2025. On Malaria Day in the Americas, PAHO urges countries to close access gaps in diagnosis and treatment to end malaria.
16. Ferreira MU, Gamboa D, Torres K, Rodriguez-Ferrucci H, Soto-Calle VE, Pardo K, et al. Evidence-Based Malaria Control and Elimination in the Amazon: Input from the International Center of Excellence in Malaria Research Network in Peru and Brazil. Am J Trop Med Hyg. 2022 Oct 11;107(4_Suppl):160–7.
17. Lopes LCP. Malaria mortality in Brazil: an age-period cohort study. Malar J. 2025 Apr 25;24(1):135.
18. Maselli LMF, Levy D, Laporta GZ, Monteiro AM, Fukuya LA, Ferreira-da-Cruz MF, et al. Detection of Plasmodium falciparum and Plasmodium vivax subclinical infection in non-endemic region: implications for blood transfusion and malaria epidemiology. Malar J. 2014 Jun 6;13:224.
19. World Health Organization. Basic malaria microscopy. Learner’s guide. 2nd. WHO; 2010.
20. Abebe A, Belayneh M, Asrat H, Kassa W, Gashu A, Desale A, et al. Performance evaluation of malaria microscopists working at rechecking laboratories in Ethiopia. Malariaworld J. 2017;8:6.
21. Jaleta F, Garoma G, Gerenfes T. Evaluation of Malaria Microscopy Diagnosis Performance in Public Hospitals of Eastern and Central Part of Oromia Region, Ethiopia, 2019</p>. Pathol Lab Med Int. 2020 Aug;Volume 12:1–8.
22. Dhorda M, Ba EH, Kevin Baird J, Barnwell J, Bell D, Carter JY, et al. Towards harmonization of microscopy methods for malaria clinical research studies. Malar J. 2020 Sep 4;19(1):324.
23. Coro F, De Maria C, Mangano VD, Ahluwalia A. Technologies for the point-of-care diagnosis of malaria: a scoping review. Infect Dis Poverty. 2025 Jun 23;14(1):54.
24. Cunningham J, Jones S, Gatton ML, Barnwell JW, Cheng Q, Chiodini PL, et al. A review of the WHO malaria rapid diagnostic test product testing programme (2008-2018): performance, procurement and policy. Malar J. 2019 Dec 2;18(1):387.
25. Ojeniyi FD, Ayoola AO, Ibitoye O, Opaleye OO, Olowe OA, Ehigie LO, et al. Performance and challenges of malaria rapid diagnostic tests in endemic regions of Africa. Sci Rep. 2025 Dec 11;15(1):43663.
26. Okai T, Chan CW, Kc A, Omondi P, Musyoka K, Kongere J, et al. Plasmodium falciparum with pfhrp2 and pfhrp3 gene deletions in asymptomatic malaria infections in the Lake Victoria region, Kenya. Trop Med Health. 2024 Dec 18;52(1):94.
27. Molina-de la Fuente I, Pastor A, Herrador Z, Benito A, Berzosa P. Impact of Plasmodium falciparum pfhrp2 and pfhrp3 gene deletions on malaria control worldwide: a systematic review and meta-analysis. Malar J. 2021 Jun 22;20(1):276.
28. Kumari S, Ahmed MZ, Sharma S, Pande V, Anvikar AR. Prevalence of Pfhrp2/3 gene deletions among false negative rapid antigen test results in central India. J Vector Borne Dis. 2021;58(3):273–80.
29. Getie S, Mekonnen GG, Meda AL, Birhanie M, Abere A, Noedl H. High Prevalence of Pfhrp2/3 Gene Deletions and Major Threat to Malaria Control Programs in Ethiopia. J Trop Med. 2024;2024:8848997.
30. Pereira Mascarenhas ME, Louzada J, Amorim Rosa R, de Assis GMP, Satiko Kano F, Oliveira-Ferreira J, et al. Very low prevalence of Plasmodium falciparum histidine-rich protein 2 (pfhrp2) gene deletion in the Brazil, Venezuela, and Guyana tri-border. Sci Rep. 2025 Jan 3;15(1):669.
31. World Health Organization. Surveillance template protocol for pfhrp2/pfhrp3 gene deletions, second edition. Geneva; 2024.
32. Rougemont M, Van Saanen M, Sahli R, Hinrikson HP, Bille J, Jaton K. Detection of four Plasmodium species in blood from humans by 18S rRNA gene subunit-based and species-specific real-time PCR assays. J Clin Microbiol. 2004 Dec;42(12):5636–43.
33. Notomi T, Mori Y, Tomita N, Kanda H. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP): principle, features, and future prospects. J Microbiol. 2015 Jan;53(1):1–5.
34. Hopkins H, González IJ, Polley SD, Angutoko P, Ategeka J, Asiimwe C, et al. Highly sensitive detection of malaria parasitemia in a malaria-endemic setting: performance of a new loop-mediated isothermal amplification kit in a remote clinic in Uganda. J Infect Dis. 2013 Aug 15;208(4):645–52.
35. Viana GMR, Silva-Flannery L, Lima Barbosa DR, Lucchi N, do Valle SCN, Farias S, et al. Field evaluation of a real time loop-mediated isothermal amplification assay (RealAmp) for malaria diagnosis in Cruzeiro do Sul, Acre, Brazil. PLoS One. 2018;13(7):e0200492.
36. Kamaliddin C, Sutherland CJ, Houze S, Cottrell G, Briand V, Castaneda Mogollon D, et al. The Role of Ultrasensitive Molecular Methods for Detecting Malaria-The Broader Perspective. Clin Infect Dis. 2021 Sep 15;73(6):e1387–90.
37. Gupta H, Sharma S, Gilyazova I, Satyamoorthy K. Molecular tools are crucial for malaria elimination. Mol Biol Rep. 2024 Apr 20;51(1):555.
38. World Health Organization. Screening donated blood for transfusion-transmissible infections: recommendations. Geneva: WHO Press; 2010. 67 p.
39. Gomes de Almeida AC, Shuan Laco AC, Rodrigues MG, Godinho de Siqueira VG, de Moura Brito FB, Gato CM, et al. Improving blood safety: NAT-based detection of Plasmodium spp. in blood donors in endemic area of Brazil. Blood Transfus. 2025 Nov 28;
40. Longley RJ, White MT, Takashima E, Brewster J, Morita M, Harbers M, et al. Development and validation of serological markers for detecting recent Plasmodium vivax infection. Nat Med. 2020 May;26(5):741–9.
41. Helb DA, Tetteh KKA, Felgner PL, Skinner J, Hubbard A, Arinaitwe E, et al. Novel serologic biomarkers provide accurate estimates of recent Plasmodium falciparum exposure for individuals and communities. Proc Natl Acad Sci U S A. 2015 Aug 11;112(32):E4438-47.
42. World Health Organization. Malaria surveillance, monitoring and evaluation: a reference manual. Second Edition. Geneva: World Health Organization; 2025.
43. Sáez-Alquézar A, Ramos AM, Di Santi SM, Branquinho MS, Kirchgatter K, Cordeiro IA, et al. [Control of blood transfusion malaria in an endemic and in a non-endemic region in Brazil]. Rev Soc Bras Med Trop. 1998;31(1):27–34.
44. Folegatti PM, Siqueira AM, Monteiro WM, Lacerda MVG, Drakeley CJ, Braga ÉM. A systematic review on malaria sero-epidemiology studies in the Brazilian Amazon: insights into immunological markers for exposure and protection. Malar J. 2017 Mar 7;16(1):107.
45. Chaudhury S, Bolton JS, Kamau E, Bergmann-Leitner ES. Assessing the Feasibility of Using a Multiplex Serological Assay to Conduct Serosurveillance for Malaria Exposure in Deployed Military Personnel. Trop Med Infect Dis. 2025 Jan 2;10(1).
46. Verra F, Angheben A, Martello E, Giorli G, Perandin F, Bisoffi Z. A systematic review of transfusion-transmitted malaria in non-endemic areas. Malar J. 2018 Jan 16;17(1):36.
47. Nansseu JRN, Noubiap JJN, Ndoula ST, Zeh AFM, Monamele CG. What is the best strategy for the prevention of transfusion-transmitted malaria in sub-Saharan African countries where malaria is endemic? Malar J. 2013 Dec 28;12:465.
48. Rocha D, de Melo GC, Carneiro JMH, Ribeiro M, Ribeiro S, de Godoy DT, et al. Use of a NAT-based assay to improve the surveillance system and prevent transfusion-transmitted malaria in blood banks. Malar J. 2020 Jul 31;19(1):275.
49. Bousema T, Okell L, Felger I, Drakeley C. Asymptomatic malaria infections: detectability, transmissibility and public health relevance. Nat Rev Microbiol. 2014 Dec;12(12):833–40.
50. Ahmadpour E, Foroutan-Rad M, Majidiani H, Moghaddam SM, Hatam-Nahavandi K, Hosseini SA, et al. Transfusion-Transmitted Malaria: A Systematic Review and Meta-analysis. Open Forum Infect Dis. 2019 Jul;6(7):ofz283.
51. Niederhauser C, Galel SA. Transfusion-Transmitted Malaria and Mitigation Strategies in Nonendemic Regions. Transfus Med Hemother. 2022 Aug;49(4):205–17.
52. Okalla Ebongue C, Ngouadjeu Dongho E, Texier G, Nda Mefo’o JP, Sume Etapelong G, Ayong L, et al. Residual risk of transfusion-transmitted malaria infection in a malaria endemic sub-Saharan African setting. Transl Med Commun. 2017 Dec 11;2(1):4.
53. Costa E, Rocha D, Lopes JIF, Andrade E, Cardoso P, Ribeiro M, et al. Detection of Plasmodium spp. in asymptomatic blood donors by the new Brazilian NAT PLUS HIV/HBV/HCV/Malaria Bio-Manguinhos kit. Transfusion (Paris). 2024 Mar;64(3):501–9.
54. Ministério da Saúde. Brasil. Nota Técnica no 49/2023 – Implementação do ensaio NAT PLUS HIV/HBV/HCV/Malária. Brasília : Ministério da Saúde – MS; 2023.
55. Mungai M, Tegtmeier G, Chamberland M, Parise M. Transfusion-transmitted malaria in the United States from 1963 through 1999. N Engl J Med. 2001 Jun 28;344(26):1973–8.
56. White NJ, Pukrittayakamee S, Hien TT, Faiz MA, Mokuolu OA, Dondorp AM. Malaria. Lancet. 2014 Feb 22;383(9918):723–35.
57. Monteiro W, Brito-Sousa JD, Elizalde-Torrent A, Bôtto-Menezes C, Melo GC, Fernandez-Becerra C, et al. Cryptic Plasmodium chronic infections: was Maurizio Ascoli right? Malar J. 2020 Nov 30;19(1):440.
58. Hartley MA, Hofmann N, Keitel K, Kagoro F, Antunes Moniz C, Mlaganile T, et al. Clinical relevance of low-density Plasmodium falciparum parasitemia in untreated febrile children: A cohort study. PLoS Med. 2020 Sep;17(9):e1003318.
59. White NJ. Determinants of relapse periodicity in Plasmodium vivax malaria. Malar J. 2011 Oct 11;10:297.
60. Alho RM, Machado KVA, Val FFA, Fraiji NA, Alexandre MAA, Melo GC, et al. Alternative transmission routes in the malaria elimination era: an overview of transfusion-transmitted malaria in the Americas. Malar J. 2017 Feb 15;16(1):78.
61. Milani P, Wen L, Montalvo L, Bakkour Coco S, Di Germanio C, Bres V, et al. Development and Validation of a Pan- Plasmodium Molecular Assay as a Confirmatory Method for Malaria Blood Donor Screening. 2025.
62. Anand A, Mace KE, Townsend RL, Madison-Antenucci S, Grimm KE, Espina N, et al. Investigation of a case of suspected transfusion-transmitted malaria. Transfusion (Paris). 2018 Sep;58(9):2115–21.
63. Yalley AK, Ocran J, Cobbinah JE, Obodai E, Yankson IK, Kafintu-Kwashie AA, et al. Advances in Malaria Diagnostic Methods in Resource-Limited Settings: A Systematic Review. Trop Med Infect Dis. 2024 Aug 23;9(9).

 

Correspondência

Mauren Isfer Anghebem

E-mail: [email protected]