Emprego de MicroRNAs como intervenção no diagnóstico precoce do câncer de mama: uma revisão sistemática

Use of MicroRNAs as an intervention in the early diagnosis of breast cancer: a systematic review

 

Bruna Kühnel1, Cristian Roncada2, Marco Antônio Ghiotto3

 

1,2  Centro Universitário da Serra Gaúcha, Biomedicina. Caxias do Sul, RS, Brasil.

3 Universidade FEEVALE, Biomedicina. Novo Hamburgo, RS, Brasil.

 

Recebido em 18/02/2025

Aprovado em 02/07/2025

DOI: 10.21877/2448-3877.202500223.pt

 

INTRODUÇÃO

 

O câncer de mama (CM) é a neoplasia maligna que mais acomete mulheres no Brasil e no mundo. Segundo dados do Instituto Nacional de Câncer (INCA), trata-se da principal causa de morte por câncer entre mulheres, ficando atrás apenas dos tumores de pele não melanoma em termos de incidência. Estimativas atualizadas, publicadas anualmente, evidenciam a evolução da incidência e da mortalidade por região, caracterizando o CM como um grave problema de saúde pública. No Brasil, a Região Sul apresenta os maiores índices da doença, com destaque para o estado de Santa Catarina, que registra a maior taxa ajustada de novos casos. Santa Catarina, seguida pelo Rio Grande do Sul e pelo Paraná, também apresenta uma elevada taxa de mortalidade por CM. Essa alta incidência é atribuída a fatores como maior conhecimento sobre a doença, além do acesso ao diagnóstico e ao tratamento adequados.(1,2) Embora o CM seja raro antes dos 30 anos, o risco aumenta progressivamente com a idade. No entanto, estudos apontam que a doença tem surgido com maior frequência em mulheres mais jovens. Os principais sintomas incluem nódulos na mama ou na axila, dor mamária, retração da pele ou do mamilo, inchaço e perda de peso.(3) A detecção precoce é fundamental para um melhor prognóstico, sendo a mamografia o exame padrão ouro para rastreamento, recomendada para mulheres dentro de faixas etárias específicas, com realização em intervalos regulares.(4)

O atraso no diagnóstico do câncer de mama (CM) pode levar a consequências graves, aumentando significativamente o risco de mortalidade. As taxas de sobrevida variam de acordo com diversos fatores, como condições nutricionais, imunidade, idade da paciente e o potencial de metástase do tumor. Mulheres jovens e gestantes apresentam, em geral, menores taxas de sobrevida. O tratamento do CM inclui cirurgias, radioterapia, hormonioterapia e quimioterapia, sendo a identificação precoce da malignidade fundamental para o sucesso terapêutico.(5,6) Nesse contexto, os microRNAs (miRNAs) têm se destacado por seu papel essencial na regulação de processos biológicos como proliferação celular, apoptose e diferenciação, influenciando diretamente o desenvolvimento e a progressão do CM. Os genes codificadores de miRNAs localizam-se frequentemente em regiões cromossômicas instáveis e podem ser detectados no plasma ou soro sanguíneo, possibilitando a distinção entre indivíduos saudáveis e aqueles com câncer. Essa característica torna os miRNAs biomarcadores promissores para a detecção precoce da doença.(7,8)

Mediante tais fatos, o objetivo do presente estudo é contribuir para a melhoria dos programas de rastreamento e diagnóstico do câncer de mama, proporcionando uma abordagem mais precisa e eficaz para identificar a doença em seus estágios iniciais, aumentando as opções de tratamento e as taxas de sobrevida, oferecendo uma nova perspectiva na luta contra o câncer de mama.

 

MÉTODO

 

Revisão sistemática da literatura, registrada pelo número CRD42024566138 na plataforma International Prospective Register of Systematic Reviews (PROSPERO)(9) e segue as recomendações do Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Aanalyses (PRISMA).(10)

A combinação de descritores utilizada como estratégia de busca foi “MicroRNAs OR miRNAs AND Breast Cancer Diagnosis”, a qual foi realizada na base de dados MEDLINE por meio do site PubMed, da BIREME, por meio do site SciELO e Elsevier por meio do site ScienceDirect. Simultâneo à estratégia de busca utilizada nas bases citadas, foi utilizado filtro para delimitar data limite de publicação para pesquisas a partir de 2010. Para fins de validação da busca, a lógica utilizada no site do PubMed foi: (MicroRNAs[Title/Abstract] OR MicroRNAs[MeshTerms] OR miRNAs[Title/Abstract] OR miRNAs[MeshTerms]) AND (“Breast Cancer”[Title/Abstract] OR “Breast Cancer”[MeshTerms]) AND (Diagnosis[Title/Abstract] OR Diagnosis[MeshTerms]).

Após a exportação dos estudos selecionados nas bases de dados, foi utilizado o software StArt (State of the Art through Systematic Review)(11) para elaboração do fluxograma do estudo, conmtemplando quatro fases: a) identificação – recrutamento dos estudos; b) seleção – duplicidade e exclusão a partir da leitura dos títulos e resumos; c) elegibilidade – exclusão a partir da leitura integral dos estudos e d) inclusão – estudos elegíveis, conforme critérios de inclusão preestabelecidos.

A seleção dos artigos foi conduzida em três fases independentes por dois pesquisadores e revisada por um terceiro colaborador. Os critérios de inclusão adotados foram os seguintes: artigos que foram selecionados por ambos os pesquisadores na triagem inicial foram incluídos diretamente na revisão; além disso, estudos identificados a partir da leitura das referências dos artigos já incluídos na fase de elegibilidade também foram considerados para inclusão. Por outro lado, os critérios de exclusão envolveram artigos que não foram selecionados por nenhum dos dois pesquisadores, que foram automaticamente descartados. Para os casos em que um artigo foi selecionado por apenas um dos pesquisadores, ele foi submetido à análise do terceiro colaborador, que tomou a decisão final sobre sua inclusão ou exclusão. A pesquisa foi realizada entre agosto e setembro de 2024. Para a extração dos dados e identificação dos estudos elegíveis, foram utilizadas tabelas pré-formatadas que registraram informações como autor principal, ano de publicação, período de realização e coleta dos ensaios clínicos, país do estudo, número de participantes e tipo de estudo (delineamento).

Como critérios de inclusão na sistemática, foram adotados estudos de ensaios clínicos randomizados, ensaios clínicos não randomizados, relatos de caso, estudos comparativos e casos-controle que discutam sobre microRNAs como diagnóstico precoce de câncer de mama.

 

RESULTADOS

 

No total, foram selecionados 210 artigos, sendo 22 da base de dados do PubMed (MEDLINE), 180 da base de dados da SienceDirect (Elsevier) e 2 da base de dados do SciELO (BIREME) e 6 por meio de literatura cinzenta. A seleção desses artigos adicionais seguiu os mesmos critérios de elegibilidade aplicados aos demais estudos, sendo eles identificados por meio de busca nas referências dos artigos incluídos e por recomendação de especialistas na área, visando complementar lacunas identificadas na análise preliminar. Destes, 3 foram excluídos previamente por duplicidade entre as bases de dados. Assim, dos 207 artigos, 180 foram excluídos na leitura do título e resumo, restando 21 artigos para leitura integral, sendo elegíveis à revisão sistemática 21 estudos, conforme Figura 1.

 

Figura 1

Fluxograma dos artigos elegíveis à revisão sistemática

Fonte: Adaptado de PRISMA10.

 

Dos 21 artigos elegíveis à revisão sistemática, a distribuição por país revela que a China foi o país com maior número de estudos publicados (n = 6; 28,6%),(11,14,15,24,25,30) indicando um forte interesse da comunidade científica chinesa na pesquisa de microRNAs (miRNAs) no diagnóstico precoce do câncer de mama. Em seguida, Egito (n = 4)(17,21,23,26) e Alemanha (n = 3)(12,13,19) também se destacaram, refletindo uma contribuição significativa de países em desenvolvimento e europeus.

Quanto ao tipo de delineamento, predominam os estudos de caso-controle (n = 9),(12-14,16,20,21,23,26,29) seguidos por observacionais (n = 7),(18,19,24,25,27,28,30) retrospectivos (n = 2),(17,31) clínico (n = 1)(23) e de coorte (n = 1).(11) Isso demonstra uma forte preferência por abordagens que buscam identificar associações entre a expressão de miRNAs e a presença do câncer de mama, sendo o desenho caso-controle o mais apropriado para avaliação diagnóstica.

A quantidade total de participantes nos estudos variou consideravelmente, com destaque para o estudo de Enders et al.,(15) com 525 participantes, o que contribui para uma maior robustez estatística. No total, os 21 estudos somaram 1.871 participantes. A média de idade relatada nos estudos que informaram essa variável foi de aproximadamente 53,3 anos, faixa compatível com a maior incidência da doença em mulheres adultas.

Por fim, é importante destacar que em 7 dos 21 estudos (33,3%) a idade média dos participantes não foi informada (NC), o que limita parcialmente a análise demográfica completa dos estudos. Ainda assim, os dados disponíveis sugerem que a maioria das amostras foi composta por mulheres em idade compatível com o maior risco para desenvolvimento do câncer de mama, conferindo validade clínica às amostragens, conforme apresentado na Tabela 1.

Tabela 1

Classificação amostral dos artigos elegíveis à revisão sistemática.

Autor Ano Ano de

coleta

 País Tipo de estudo N-Total Média

Idade
Wang et al.11 2010 2007-2008 China Estudo de coorte 108 48
Cuk et al.12 2012 2010-2011 Alemanha Estudo de caso-controle 207 56,6
Schrauder et al.13 2012 2011 Alemanha Estudo de caso-controle 153 61,9
Wu et al.14 2012 2011 China Estudo de caso-controle 188 55
Enders et al.15 2013 2008-2010 China Estudo de caso-controle 525 58,5
Kodahl et al.16 2014 1994-1997 Dinamarca Estudo de caso-controle 83 57
Ismail et al.17 2018 2015 Egito Estudo retrospectivo 80 NC
Halvorsen et al18. 2017 2003-2012 Noruega Estudo observacional 60 NC
Kahraman et al.19 2018 2015-2016 Alemanha Estudo observacional 21 58,3
Orangi et al.20 2018 2018 Irã Estudo caso-controle 62 53,7
Swellam et al.21 2018 2015 Egito Estudo observacional 235 NC
Fang et al.22 2019 2018 USA Estudo de caso-controle 131 61
El-Shafae et al.23 2020 2018-2019 Egito Estudo clínico 100 42,4
Guo et al.24 2020 2015-2016 China Estudo observacional 39 49,5
Han et al.25 2020 2010-2013 China Estudo observacional 144 NC
Yousif et al.26 2020 2018-2019 Egito Estudo caso-controle 100 44,2
Adam-Artigues et al.27 2021 1988-2019 Portugal Estudo observacional 112 NC
Bakr et al.28 2021 2007-2018 Tunísia Estudo observacional 321 NC
Elhelbawy et al.29 2021 2019-2020 Egito Estudo de caso-controle 130 49,9
Zhang et al.30 2021 2007-2018 China Estudo observacional 8 NC
Hachana et al.31 2024 2007-2018 Tunísia Estudo retrospectivo 64 NC

USA: Estados Unidos da América; NC: Não consta

 

A Tabela 2 destaca o desempenho diagnóstico de diferentes miRNAs analisados nos estudos incluídos nesta revisão sistemática. Observa-se que a maioria dos trabalhos empregou a técnica de PCR em tempo real (RT-qPCR), além de variações como TaqMan Low Density Arrays e microarrays, evidenciando que essas metodologias são amplamente aceitas para a avaliação da expressão de miRNAs em amostras biológicas. Dentre os miRNAs investigados, diversos se destacaram pela alta sensibilidade e especificidade, reforçando seu potencial como biomarcadores diagnósticos no câncer de mama.

O miR-1204, por exemplo, demonstrou um dos melhores desempenhos nos estudos analisados, apresentando sensibilidade de 94,8% e especificidade de 82,3% em tecido, além de 79,6% e 92,5%, respectivamente, em amostras de soro.(25) Da mesma forma, o miR-373 apresentou resultados expressivos, com sensibilidade de até 93,4% e especificidade de até 99%, conforme reportado por Swellam et al.21 e Bakr et al.,(28) consolidando-se como um dos miRNAs mais promissores. A combinação de miR-145 e miR-451 também se mostrou eficaz, alcançando sensibilidade de 90% e especificidade de 92%15 o que demonstra a vantagem da utilização de painéis multimarcadores para aumentar a acurácia diagnóstica. Resultados semelhantes foram observados com os miRNAs 148a e 30c, que apresentaram sensibilidades superiores a 94% e especificidades acima de 90%, tornando-se candidatos consistentes para aplicação clínica.(29)

Outros painéis de miRNAs, como o composto por miR-185-5p e miR-362-5p, demonstraram elevada acurácia diagnóstica, com sensibilidade de 92,65%, especificidade de 92,31% e área sob a curva (AUC) de 0,957.(30) Adicionalmente, miRNAs como o miR-99a, com 76,7% de sensibilidade e 95% de especificidade,(26) o miR-195, com 90% de sensibilidade e 100% de especificidade,(23) e o miR-222, com 97,8% de sensibilidade e especificidade de 75,5%,(21) também se destacaram nos estudos avaliados.

Apesar desses resultados promissores, alguns estudos apresentaram limitações, como a ausência de dados completos sobre sensibilidade e especificidade, como é o caso de Wang et al.,(11) Halvorsen et al.(18) e Hachana et al.,(31) o que dificulta comparações diretas entre todos os miRNAs analisados. Ainda assim, estudos como o de Kahraman et al.(19) reforçam que a utilização de múltiplos miRNAs em painéis diagnósticos pode aumentar substancialmente a acurácia. Um conjunto de sete miRNAs descrito nesse estudo atingiu sensibilidade de 83,8% e especificidade de 74,2%, sendo que o melhor desempenho individual observado alcançou 95,2% de sensibilidade e 76,2% de especificidade. Esses achados sustentam a relevância dos miRNAs como ferramentas diagnósticas eficazes, com potencial para complementar os métodos convencionais na detecção precoce do câncer de mama.

Já a Tabela 3 resume os objetivos, os principais resultados e as conclusões dos 21 estudos incluídos na revisão, permitindo uma análise integrada do papel dos miRNAs como biomarcadores no diagnóstico precoce do câncer de mama.

A maioria dos estudos teve como foco central a identificação de miRNAs diferencialmente expressos em pacientes com câncer de mama em comparação com indivíduos saudáveis. Entre os achados mais recorrentes, destacam-se os miRNAs miR-21, miR-155, miR-373, miR-222, miR-145, miR-451, miR-195, miR-99a, miR-30c e miR-148a, frequentemente associados a elevada sensibilidade e especificidade diagnóstica.

Diversos estudos, como os de Swellam et al.,(21) Elhelbawy et al.(29) e Zhang et al.,(30) reportaram AUCs superiores a 0,95, indicando alto poder discriminatório dos miRNAs para distinguir casos de câncer de mama de controles. Em particular, miR-30c e miR-148a atingiram AUCs de 0,998 e 0,995, respectivamente, com sensibilidades acima de 94% e especificidades superiores a 90%, reforçando seu potencial como marcadores diagnósticos altamente confiáveis.

Estudos como os de Han et al.(25) e El-Shafae et al.(23) destacaram o valor prognóstico dos miRNAs, associando sua expressão a características tumorais agressivas, como estágio clínico avançado, grau histológico elevado e presença de metástase em linfonodos. Além disso, Kahraman et al.(19) demonstraram que perfis de miRNA também podem ser utilizados para monitorar resposta à quimioterapia, ampliando sua aplicabilidade clínica além do diagnóstico.

Outros estudos, como de Orangi et al.(20) e de Hachana et al.,(31) sugerem que alguns miRNAs podem ser úteis na discriminação entre diferentes subtipos histológicos de tumores mamários, como tumores phyllodes e ductais invasivos.

De forma geral, os resultados apontam para uma expressiva consistência entre os estudos na identificação de miRNAs como ferramentas promissoras, tanto para diagnóstico precoce quanto para estratificação prognóstica no câncer de mama. A utilização de painéis multimarcadores foi comum em vários trabalhos, como em Schrauder et al.(13) e Fang et al.,(22) aumentando a acurácia diagnóstica quando comparada à análise isolada de um único miRNA.

 

 

Tabela 2

Classificação das variáveis de miRNA, protocolos aplicados e níveis de sensibilidade e especificidade.

Autor Ano miRNA estudado Protocolo aplicado Sensibilidade e especificidade
Wang et al.11 2010 miR-21, miR-106a, miR-126, miR-155, miR-199a, miR-335 PCR em tempo real. NC
Cuk et al.12 2012 miR-148b, miR-376c, miR-409-3p, miR-801 Profiling de miRNA usando TaqMan low-density arrays. miR-148b, miR-409-3p e miR-801 AUC de 0.69, com 70% de sensibilidade e 55% de especificidade.
Schrauder et al.13 2012 miR-202 e miR-718 Microarray-based miRNA profiling seguido de validação por RT-qPCR. Sensibilidade de 92,5% e especificidade de 78,8% para a combinação de miRNAs.
Wu et al.14 2012 miR-222 e outros miRNAs co-up-regulados (miR-103, miR-23a, miR-29a, miR-23b, miR-24, miR-25). Sequenciamento de próxima geração (SOLiD) e validação por PCR em tempo real. Sensibilidade de 74% e especificidade de 60% para miR-222 na discriminação de câncer de mama.
Enders et al.15 2013 miR-145 e miR-451 Profiling de miRNA usando TaqMan em plasma e tecido tumoral de pacientes com câncer de mama. Sensibilidade de 90% e especificidade de 92% para a combinação de miR-145 e miR-451.
Kodahl et al.16 2014 miR-15a, miR-18a, miR-107, miR-133a, miR-139-5p, miR-143, miR-145, miR-365, miR-425.  

PCR em tempo real.

 

 Sensibilidade de 83,3% e especificidade de 41,2% com um valor preditivo positivo de 62,5% e um valor preditivo negativo de 67,4%.
Ismail et al.17 2015 miR-639 e miR-10b qRT-PCR. Sensibilidade de 65% para miR-639 e 78,3% para miR-10b; especificidade não especificada.
Halvorsen et al.18 2017 61 microRNAs, incluindo miR-126-5p, miR-1274b, miR-1825, miR-195-5p, miR-20b-5p, miR-454-3p, e miR-93-5p. TaqMan Low Density Arrays e microarrays de hibridização. NC
Kahraman et al.19 2018 hsa-miR-101-3p, hsa-miR-126-3p, hsa-miR-126-5p,hsa-miR-144-3p, hsa-miR-144-5p, hsa-miR-301a-3p, hsa-miR-664b-5p, hsa-miR-93-5p,hsa-miR-34a-5p, hsa-miR-664b-3p, hsa-let-7d-5p, hsa-miR-361-5p, hsa-miR-18a-5p, hsa-miR-2110, hsa-miR-224-5p, hsa-miR-100-5p, hsa-miR-365a-3p, hsa-miR-92a-3p Microarrays e RT-qPCR para análise de miRNA em amostras de sangue. miR-126-5p para CM triplo-negativo inicial sensibilidade de 84%. Um conjunto de sete miRNAs apresentou precisão média de 79%, com sensibilidade de 83,8% e especificidade de 74,2%. O melhor desempenho observado foi de 85,7% de precisão, 76,2% de especificidade e 95,2% de sensibilidade.
Orangi et al.20 2018 miR-9 e miR-34a RT-qPCR. miR-9: Sensibilidade 83,33%, Especificidade 70,37%V]H;.
miR-34a: Sensibilidade 72%, Especificidade 76% .
Swellam et al.21 2018 miRNA-21, miRNA-222, miRNA-373 RT- qPCR. miRNA-21: Sensibilidade 70,8%, Especificidade 91,8%. miRNA-222: Sensibilidade 97,8%, Especificidade 75,5%. miRNA-373: Sensibilidade 93,4%, Especificidade 99%.
Fang et al.22 2019 hsa-miR-21-3p, hsa-miR-192-5p, hsa-miR-221-3p, hsa-miR-451a, hsa-miR-574-5p, hsa-miR-1273g-3p, hsa-miR-152, hsa-miR-22-3p, hsa-miR-222-3p, hsa-miR-30a-5p, hsa-miR-30e-5p, hsa-miR-324-3p, hsa-miR-382-5p. Sequenciamento + RT-qPCR. Sensibilidade de 88,1% e especificidade de 77,5%.
El-Shafae et al.23 2020 miR-195 RT-PCR. Sensibilidade de 90%, especificidade de 100%.
Guo et al.24 2020 miR-1273g-3p qRT-PCR. ROC: miR-1273g-3p p=0,0414. A AUC:0,6333.
Han et al.25 2020 miR-1204 qRT-PCR. A análise ROC para a expressão de miR-1204 em tecido mostrou sensibilidade de 94,8% e especificidade de 82,3%. Para o miR-1204 sérico, a sensibilidade foi de 79,6% e a especificidade de 92,5%.
Yousif et al.26 2020 miR-99a RT-PCR em tempo real com tecnologia SYBR Green. Sensibilidade de 76.7% e especificidade de 95%.
Adam-Artigues et al.27 2021 miR-30b-5p PCR em tempo real e análise de curva ROC. Tecido: 83% sensibilidade, 80% especificidade. Plasma: 78,31% sensibilidade, 72,30% especificidade.
Bakr et al.28 2021 miRNA-373 Análise de expressão de miRNA-373 e seus genes-alvo (VEGF e cyclin D1) em pacientes com CM. ROC: Sensibilidade: 90,8% para o miRNA-373, com um ponto de corte de 360 ng/ml. Especificidade: 98,4% para o miRNA-373, também com um ponto de corte de 360 ng/ml.
Elhelbawy et al.29 2021 miRNA-148a e miRNA-30c PCR em tempo real. MiR-30c: 97,33% de sensibilidade, 96,36% de especificidade. MiR-148a: 94,67% de sensibilidade, 90,91% de especificidade.
Zhang et al.30 2021 miR-26b-5p, miR-106b-5p, miR-142-3p, miR-142-5p, miR-185-5p, miR-362-5p. Microarray e validação por qRT-PCR. 0,957, sensibilidade de 92,65% e especificidade de 92,31%.
Hachana et al.31 2024 hsa-miR-21, hsa-miR-155, hsa-miR-182, hsa-miR-34a, hsa-miR-148a, hsa-miR-205 PCR em tempo real. NC

Legenda: PCR: Reação em Cadeia da Polimerase; NC: Não consta; RT-qPCR: Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real com Transcrição Reversa; CM: Câncer de Mama; ROC: Característica Operacional do Receptor; AUC: Área Sob a Curva.

 

 

 

Tabela 3

Descrição dos objetivos, principais resultados e conclusões dos estudos elegíveis à revisão sistemática.

Autor Ano Objetivo Principais resultados Conclusão do estudo
Wang et al.11 2010 Investigar a expressão e correlação de miRNAs selecionados associados ao câncer de mama em tecidos e amostras de soro correspondentes MiR-21, miR-106a e miR-155 estavam superexpressos em tecidos tumorais, enquanto miR-126, miR-199a e miR-335 estavam subexpressos. A expressão seletiva de miRNAs pode servir como biomarcadores potenciais para diagnóstico, classificação e prognóstico do CM.
Cuk et al.12 2012 Investigar o potencial dos miRNAs circulantes como marcadores de detecção precoce para câncer de mama 4 miRNAs (miR-148b, miR-376c, miR-409-3p e miR-801) foram significativamente up-regulados em CM; AUC de 0,69 para a combinação de miR-148b, miR-409-3p e miR-801. Os miRNAs identificados podem ser utilizados no desenvolvimento de um teste de sangue multimarcador para complementar a detecção precoce do CM
Schrauder et al.13 2012 Investigar se o perfil de miRNA no sangue pode discriminar entre pacientes com câncer de mama em estágio inicial e controles saudáveis 59 miRNAs foram diferencialmente expressos; 13 miRNAs estavam significativamente up-regulados e 46 down-regulados; Sensibilidade de 92,5% e especificidade de 78,8% com um conjunto de 240 miRNAs. O perfil de miRNA em sangue total tem potencial como um novo método para a detecção precoce do CM.
Wu et al.14 2012 Investigar se miRNAs específicos estão co-expressos no soro e tecido de pacientes com câncer de mama como biomarcadores potenciais 7 miRNAs co-up-regulados (miR-103, miR-23a, miR-29a, miR-222, miR-23b, miR-24 e miR-25); miR-222 foi significativamente aumentado no soro de pacientes com CM, com AUC de 0,67 para discriminação entre pacientes e controles. Os miRNAs no soro podem ser biomarcadores potenciais para a detecção do CM
Enders et al.15 2013 Desenvolver um ensaio específico baseado em miRNA no sangue para detecção de câncer de mama 8 miRNAs up-regulados e 1 down-regulado; combinação de miR-145 e miR-451 como os melhores biomarcadores com AUC de 0,956; sensibilidade de 90% e especificidade de 92% na discriminação de CM de controles saudáveis. Os miRNAs circulantes podem ser biomarcadores específicos promissores para triagem de CM.
Kodahl et al.16 2014 Investigar a expressão diferencial de miRNAs no soro de pacientes com câncer de mama e controles saudáveis Identificação de uma assinatura de 9 miRNAs (miR-15a, miR-18a, miR-107, miR-133a, miR-139-5p, miR-143, miR-145, miR-365, miR-425) que discriminou significativamente entre pacientes com CM e controles saudáveis, com AUC de 0,665 na análise ROC A assinatura de 9 miRNAs pode ser útil no desenvolvimento de um teste de sangue não invasivo para melhorar a detecção precoce do CM.
Ismail et al.17 2015 Avaliar a significância diagnóstica de miR-639 e miR-10b em pacientes com câncer de mama. MiR-639 e miR-10b apresentaram sobre-expressão significativa em CM em comparação aos controles. Sensibilidade foi de 65% para miR-639 e 78,3% para miR-10b, enquanto CA-15.3 e p53 mostraram sensibilidades de 48,3% e 55%, respectivamente. MiR-639 e miR-10b podem ser biomarcadores sensíveis e minimamente invasivos para o diagnóstico precoce do CM
Halvorsen et al18. 2017 Identificar microRNAs presentes em fluidos intersticiais tumorais para descobrir biomarcadores relevantes para diagnóstico e prognóstico do câncer de mama. 266 microRNAs estavam em maior abundância em TIF em comparação com NIF; 61 microRNAs foram detectados em mais de 75% das amostras de soro, com 7 associados a pior sobrevida e 23 relacionados à presença de células imunes e adipócitos. O perfil de microRNAs em TIF pode identificar novos biomarcadores para classificação prognóstica e detecção do CM.
Kahraman et al.19 2018 Avaliar perfis de miRNA no diagnóstico precoce e monitoramento da resposta à quimioterapia neoadjuvante em pacientes com câncer de mama triplo-negativo basal 321 miRNAs significativamente alterados após quimioterapia; miR-126-5p foi o mais significativo para a classificação diagnóstica. Perfis de miRNA no sangue podem facilitar o diagnóstico precoce de câncer de mama triplo-negativo basal e monitorar a resposta à quimioterapia
Orangi et al.20 2018 Avaliar os níveis de expressão de miR-9 e miR-34a como biomarcadores diagnósticos para câncer de mama em mulheres iranianas. MiR-9 e miR-34a estavam significativamente down-regulados em tecidos tumorais (miR-9: fold change = 0,26, p = 0,0051; miR-34a: fold change = 0,55, p = 0,021). Não houve diferença significativa nos níveis de miR-9 e miR-34a no plasma dos pacientes em comparação com os controles saudáveis. MiR-9 e miR-34a podem servir como biomarcadores diagnósticos para distinguir tecidos tumorais de tecidos saudáveis, mas não mostraram eficácia no plasma.
Swellam et al.21 2018 Investigar os níveis de expressão de miRNAs circulantes como marcadores diagnósticos para câncer de mama e sua relação com características clinicopatológicas. MiRNA-373 apresentou a maior eficácia diagnóstica (AUC = 0,987), seguido por miRNA-222 (AUC = 0,833) e miRNA-21 (AUC = 0,861). Os níveis de miRNA-21 e miRNA-373 foram significativamente mais altos em carcinoma ductal invasivo e em pacientes com metástase em linfonodos. A avaliação de miRNAs em amostras de soro pode ser aplicada como marcadores minimamente invasivos para a detecção precoce do CM e para discriminar entre diferentes características clinicopatológicas.
Fang et al.22 2019 Identificar marcadores de miRNA no câncer de mama e determinar se a expressão de miRNA é preditiva do câncer de mama em estágio inicial Um painel de cinco pares de miRNA teve alta capacidade diagnóstica com AUC de 0,942; Sensibilidade de 88,1% e especificidade de 77,5% após validação cruzada de 10 vezes Os pares de miRNA identificados são biomarcadores eficazes para triagem e distinção de CM e lesões benignas.
El-Shafae et al.23 2020 Avaliar os níveis de expressão de miR-195 e seu papel diagnóstico em pacientes com câncer de mama. Níveis circulantes de miR-195 significativamente reduzidos no grupo CM em comparação ao grupo controle (p < 0,001). A expressão de miR-195 mostrou correlação negativa significativa com o estágio do tumor, grau e extensão do tumor primário. A curva ROC indicou excelente AUC (0,987) para discriminação entre casos de BC e grupos controle. A expressão de miR-195 no soro foi reduzida em mulheres com CM, associada a alta especificidade no diagnóstico, podendo ser utilizada como um marcador diagnóstico não invasivo.
Guo et al.24 2020 Identificar miR-1273g-3p como um biomarcador para diagnóstico precoce de câncer ductal da mama Níveis de miR-1273g-3p estavam significativamente elevados em pacientes com câncer em comparação com controles saudáveis (p=0,0139); a curva ROC indicou boa capacidade diagnóstica (p=0,0414). MiR-1273g-3p pode ser um biomarcador promissor para o diagnóstico precoce de câncer ductal da mama.
Han et al.25 2020 Avaliar as expressões de miR-1204 em pacientes com câncer de mama e investigar seu potencial como biomarcador de diagnóstico e prognóstico. MiR-1204 estava aumentado em tecidos e soro de pacientes com câncer de mama; a superexpressão de miR-1204 foi identificada como um fator prognóstico independente e um potencial marcador diagnóstico. A detecção dos níveis de miR-1204 em tecidos e soro pode servir como um novo biomarcador para diagnóstico e prognóstico de CM.
Yousif et al.26 2020 Avaliar a expressão de miR-99a como um biomarcador diagnóstico e prognóstico não invasivo para câncer de mama em mulheres egípcias. A expressão sérica de miR-99a foi significativamente menor no grupo de câncer de mama (p < 0,001). MiR-99a apresentou 76,7% de sensibilidade e 95% de especificidade para o diagnóstico de câncer de mama. A expressão de miR-99a correlacionou-se com parâmetros clínicos, incluindo extensão do tumor, estágio TNM e grau histológico. A expressão sérica de miR-99a está diminuída em câncer de mama, oferecendo potencial para diagnóstico precoce e indicando um prognóstico ruim.
Adam-Artigues et al.27 2021 Avaliar o potencial do miR-30b-5p como biomarcador para diagnóstico precoce de câncer de mama em tecido e plasma. MiR-30b-5p foi significativamente mais baixo em tecidos de BC do que em tecidos saudáveis. Níveis circulantes de miR-30b-5p foram significativamente mais altos em pacientes com BC. A análise ROC mostrou AUC de 0,89 para tecido e AUC de 0,80 para plasma, com sensibilidade e especificidade variando entre os subtipos de BC. O miR-30b-5p tem potencial como biomarcador diagnóstico não invasivo, rápido, reprodutível e custo-efetivo para CM.
Bakr et al.28 2021 Analisar os níveis de expressão de miRNA-373 e seus genes-alvo (VEGF e cyclin D1) como biomarcadores para diagnóstico e prognóstico do câncer de mama MiRNA-373 e seus genes-alvo estavam up-regulados em pacientes com câncer de mama em comparação com lesões benignas e controles saudáveis; houve uma correlação significativa entre a expressão de miRNA-373 e características clínicas. MiRNA-373 pode ser um biomarcador vital para o diagnóstico e prognóstico do CM.
Elhelbawy et al.29 2021 Avaliar o papel dos miRNAs circulantes (miRNA-148a e miRNA-30c) como biomarcadores potenciais no diagnóstico, prognóstico e sobrevivência de pacientes com câncer de mama. MiR-30c apresentou AUC de 0,998, com 97,33% de sensibilidade e 96,36% de especificidade. MiR-148a teve AUC de 0,995, com 94,67% de sensibilidade e 90,91% de especificidade. Ambos os miRNAs mostraram expressão significativamente reduzida em pacientes com CM. MiR-148a e miR-30c são expressões down-reguladas em pacientes com câncer de mama e podem ser considerados biomarcadores sanguíneos promissores.
Zhang et al.30 2021 Identificar miRNAs diferencialmente expressos no sangue de pacientes com câncer de mama como potenciais biomarcadores para diagnóstico e prognóstico 6 miRNAs (miR-26b-5p, miR-106b-5p, miR-142-3p, miR-142-5p, miR-185-5p, e miR-362-5p) up-regulados em pacientes com CM; um painel de 2 miRNAs (miR-185-5p e miR-362-5p) apresentou melhor desempenho diagnóstico com AUC de 0,957, sensibilidade de 92,65% e especificidade de 92,31%. Os 6 miRNAs e o painel de 2 miRNAs podem servir como biomarcadores promissores para diagnóstico e prognóstico do CM.
Hachana et al.31 2024 Avaliar a expressão de miRNAs em tumores fibroepiteliais da mama e prever seus alvos usando técnicas computacionais MiR-21, miR-155 e miR-182 estavam up-regulados em tumores phyllodes; miR-34a, miR-148a e miR-205 estavam down-regulados em tumores borderline e malignos. Os miRNAs podem servir como biomarcadores diagnósticos para tumores phyllodes, com perfis de expressão que diferenciam entre tipos de lesões.

Legenda: PCR: Reação em Cadeia da Polimerase; NC: Não consta; RT-qPCR: Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real com Transcrição Reversa; CM: Câncer de Mama; ROC: Característica Operacional do Receptor; AUC: Área Sob a Curva; TIF: Fluidos Intersticiais Tumorais; NIF: Fluidos Intersticiais Normais.

 

 

DISCUSSÃO

 

Observa-se a ausência de estudos brasileiros entre os artigos selecionados, o que evidencia uma lacuna na produção científica nacional sobre o uso de miRNAs como biomarcadores para diagnóstico precoce de câncer de mama. Essa ausência ressalta a importância de incentivar pesquisas locais que considerem as especificidades genéticas e epidemiológicas da população brasileira.

A análise dos estudos sobre câncer de mama revela um panorama fascinante e multifacetado, em que a pesquisa se entrelaça com as nuances culturais e sociais de diversas nações, destacando a predominância de investigações realizadas em países como China e Egito, que se afirmam como epicentros de um esforço coletivo para compreender as complexidades dessa doença devastadora. O período recente de pesquisa, especialmente na última década, reflete uma crescente conscientização global acerca da importância do câncer de mama, impulsionada por avanços significativos nas metodologias de diagnóstico precoce e tratamento adequado. A média etária dos participantes dos estudos, situada em uma fase crucial da vida adulta, ressalta a relevância da pesquisa em um contexto em que a saúde da mulher se torna uma prioridade, evocando a necessidade de uma abordagem sensível e informada.

No Brasil, o Ministério da Saúde, por meio do INCA, mantém políticas de rastreamento por mamografia e programas como o “Outubro Rosa”. Internacionalmente, iniciativas como o National Breast Cancer Screening Program (EUA) e o NHS Breast Screening Programme (Reino Unido) reforçam a importância do diagnóstico precoce. A incorporação de testes moleculares com base em miRNAs poderia representar um avanço significativo nesses programas, ampliando o alcance e a precisão do rastreio.(2,32,33)

Além disso, a predominância de estudos de caso-controle e observacionais destaca a importância de metodologias que buscam não apenas identificar fatores de risco, mas também compreender as experiências vividas por pacientes em um contexto clínico real. Essas abordagens são fundamentais para a construção de um conhecimento robusto que possa informar práticas de saúde pública e estratégias de intervenção.

Os principais achados da seção de resultados reforçam o valor diagnóstico dos miRNAs no câncer de mama. Foi amplamente relatado nos estudos analisados(11-31) que a expressão de miRNAs em pacientes com câncer de mama difere significativamente daquela observada em indivíduos saudáveis, independentemente do tipo de estudo ou técnica empregada, sugerindo que esses marcadores possuem forte potencial como ferramentas diagnósticas.

Entre os biomarcadores de maior destaque, o miR-1204(25) demonstrou alta sensibilidade (94,8%) e especificidade (82,3%) em tecido, além de associação com estágio TNM avançado e metástase em linfonodos, revelando seu papel na progressão tumoral. Já o miR-1273g-3p(24) apresentou expressão elevada em pacientes com câncer, sendo apontado como um possível regulador do gene PTEN. O miR-126-5p(18,19) foi identificado como down-regulado, com sensibilidade de 84% em amostras de sangue, enquanto o miR-93-5p esteve up-regulado e refletiu alterações relacionadas ao tumor e ao tratamento.

Destacam-se ainda os miRNAs miR-373(21,28) e miR-21,(21) ambos significativamente superexpressos em pacientes, com valores de sensibilidade e especificidade superiores a 90%, indicando forte poder discriminatório. O miR-145, estudado por Kodahl et al.(16) e Enders et al.,(15) foi eficaz quando associado a outros miRNAs, com destaque para a combinação com o miR-45115, que atingiu sensibilidade de 90% e especificidade de 92%.

O painel de miRNAs relatado por Zhang et al.(30), contendo miR-185-5p e miR-362-5p, mostrou-se altamente eficaz para diagnóstico, com AUC de 0,957, sensibilidade de 92,65% e especificidade de 92,31%. Outros miRNAs como miR-30c e miR-148a(29) também se destacaram com AUCs superiores a 0,99. MiRNAs down-regulados como miR-195,(23) miR-99a(26) e miR-30b-5p(27) apresentaram expressões reduzidas em pacientes com câncer e foram associados a características clínicas desfavoráveis, sugerindo função supressora tumoral.

Adicionalmente, miR-639 e miR-10b(17) demonstraram expressão aumentada em pacientes, enquanto miR-9 e miR-34a(20) mostraram utilidade diagnóstica limitada no plasma, possivelmente devido à diluição por outros miRNAs circulantes. Painéis combinados também mostraram desempenho relevante: Fang et al.(22) reportaram sensibilidade de 88,1% e especificidade de 77,5%, e Schrauder et al.(13) observaram sensibilidade de 92,5% e especificidade de 78,8% para um grupo de 59 miRNAs.

Por fim, os dados apresentados nos estudos de Cuk et al.,(12) Wu et al.(14) e outros reforçam a viabilidade clínica de se empregar miRNAs circulantes no rastreio precoce do câncer de mama, destacando que sua aplicação em conjunto com os exames tradicionais poderia aprimorar significativamente a acurácia diagnóstica, especialmente em contextos de triagem populacional.

 

CONCLUSÃO

 

A presente revisão evidencia que os miRNAs apresentam um potencial clínico significativo como biomarcadores para o diagnóstico precoce do câncer de mama. Os estudos analisados demonstram, de forma consistente, que diversos miRNAs exibem perfis de expressão diferencial entre pacientes com câncer e indivíduos saudáveis, com elevados índices de sensibilidade e especificidade, características fundamentais para o uso diagnóstico. Esses marcadores não apenas auxiliam na detecção precoce da doença — etapa crucial para a melhora das taxas de sobrevida e eficácia do tratamento — como também oferecem possibilidades para a avaliação da progressão tumoral e da resposta terapêutica.

A utilização de painéis diagnósticos compostos por múltiplos miRNAs demonstrou ainda maior acurácia na detecção, sugerindo que a combinação de diferentes marcadores é capaz de captar melhor a heterogeneidade biológica do câncer de mama. Tal abordagem amplia as perspectivas para a personalização do diagnóstico e do tratamento, promovendo um cuidado mais preciso e eficaz.

Apesar dos avanços e do potencial demonstrado, a incorporação dos testes moleculares baseados em miRNAs na prática clínica ainda enfrenta desafios, especialmente no que diz respeito aos custos tecnológicos envolvidos. Esse fator limita seu acesso à população geral, restringindo sua aplicação a contextos mais favorecidos economicamente. Dessa forma, é urgente que se invista no desenvolvimento de tecnologias mais acessíveis e na formulação de políticas públicas que incentivem a pesquisa translacional e a democratização dessas ferramentas.

A implementação de testes com base em miRNAs nos protocolos nacionais e internacionais de rastreamento representa uma oportunidade concreta de inovação diagnóstica. Em países como o Brasil, com alta carga de morbidade e mortalidade por câncer de mama, a validação clínica e a integração desses biomarcadores nas estratégias de saúde pública são passos essenciais para ampliar o diagnóstico precoce e, consequentemente, reduzir os índices de mortalidade. Os resultados aqui sintetizados reforçam a relevância de dar continuidade a estudos clínicos voltados à validação dos miRNAs, visando sua aplicação segura, eficaz e equitativa nos sistemas de saúde.

 

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Correspondência

Bruna Kühnel

E-mail: [email protected]